公开(公告)号：CN115093469A

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN202210263568.7

申请日：2022-03-17

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  陈益 ,  卜永谦 ,  孙智远 ,  杨剑波 ,  卞蓉蓉

IPC: C07K14/255 ,  C07K1/26 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种体外原核表达肠道沙门氏菌avrA蛋白的方法。本发明所述的方法包括以下步骤：(S1)设计沙门氏菌的avrA基因的引物，进行avrA基因体外扩增；(S2)重组载体的构建：将扩增后的avrA基因与通过BamH I酶切位点和XhoI酶切位点双酶切后的pGEX‑4T‑1质粒大片段进行重组，得到重组载体pGEX‑4T‑1‑avrA质粒；(S3)重组菌的构建：将步骤(S2)得到的重组载体转化进感受态细胞中；所述的感受态细胞分别为BL21和Rosetta 2表达菌种；(S4)avrA蛋白的诱导表达：将步骤(S3)得到的重组菌在培养基中培养，将适当浓度的IPTG加入培养基中，诱导avrA蛋白表达。本发明实现了avrA蛋白在细菌裂解上清液中表达，使avrA蛋白的活性及功能更接近原始状态。

公开(公告)号：CN114566071A

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN202210059872.X

申请日：2022-01-19

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  葛广玉 ,  卞蓉蓉 ,  卜永谦 ,  孙智远 ,  杨剑波 ,  王金奎 ,  王煜恒

IPC: G09B9/00

Abstract: 本发明公开了一种临床病死禽类动物无菌采样的虚拟仿真实训系统，包括：模式选择模块，用于获取用户请求，所述用户请求包括练习模式请求和考试模式请求，若用户请求为练习模式请求时，则调用练习模式模块，进入练习模式；若用户请求为考试模式请求时，则调用考试模式模块，进入考试模式；练习模式模块，用于通过对临床病死禽类动物无菌采样的操作步骤进行逐一提示，引导用户按照提示进行操作，以及对用户的临床病死禽类动物无菌采样的操作进行记录，以及当操作存在错误时，向用户进行错误提示；考试模式模块，用于对用户的临床病死禽类动物无菌采样的操作进行记录，并基于此记录，得出用户的临床病死禽类动物无菌采样的操作成绩。

公开(公告)号：CN107475401B

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN201710804909.6

申请日：2017-09-08

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  卞蓉蓉

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/085

Abstract: 本发明公开了一种利用环介导等温扩增技术检测食源性蜡样芽孢杆菌的方法及引物。所述方法包括：提取待检测样品的DNA；以所述的DNA为模板，利用所述的引物进行LAMP反应；对反应产物进行鉴定，判断待检测样品中是否含有蜡样芽孢杆菌。发明针对蜡样芽孢杆菌毒力基因的保守序列设计引物，并进一对LAMP反应体系进行优化，可稳定、高特异性、高灵敏度的检测蜡样芽孢杆菌。

公开(公告)号：CN107365869B

公开(公告)日：2021-03-19

申请号：CN201710804890.5

申请日：2017-09-08

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  卞蓉蓉

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11 ,  C12R1/22

Abstract: 本发明公开了一种利用环介导等温扩增技术检测食源性肺炎克雷伯菌的方法及引物。所述方法包括：提取待检测样品的DNA；以所述的DNA为模板，利用所述的引物进行LAMP反应；对反应产物进行鉴定，判断待检测样品中是否含有肺炎克雷伯菌。发明针对肺炎克雷伯杆菌khe毒力基因的保守序列设计引物，并进一对LAMP反应体系进行优化，可稳定、高特异性、高灵敏度的检测肺炎克雷伯杆菌。

公开(公告)号：CN107475401A

公开(公告)日：2017-12-15

申请号：CN201710804909.6

申请日：2017-09-08

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  卞蓉蓉

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/085

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2527/137

Abstract: 本发明公开了一种利用环介导等温扩增技术检测食源性蜡样芽孢杆菌的方法及引物。所述方法包括：提取待检测样品的DNA；以所述的DNA为模板，利用所述的引物进行LAMP反应；对反应产物进行鉴定，判断待检测样品中是否含有蜡样芽孢杆菌。发明针对蜡样芽孢杆菌毒力基因的保守序列设计引物，并进一对LAMP反应体系进行优化，可稳定、高特异性、高灵敏度的检测蜡样芽孢杆菌。

公开(公告)号：CN107365869A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710804890.5

申请日：2017-09-08

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 徐云明 ,  卞蓉蓉

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/10 ,  C12N15/11 ,  C12R1/22

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2527/137

Abstract: 本发明公开了一种利用环介导等温扩增技术检测食源性肺炎克雷伯菌的方法及引物。所述方法包括：提取待检测样品的DNA；以所述的DNA为模板，利用所述的引物进行LAMP反应；对反应产物进行鉴定，判断待检测样品中是否含有肺炎克雷伯菌。发明针对肺炎克雷伯杆菌khe毒力基因的保守序列设计引物，并进一对LAMP反应体系进行优化，可稳定、高特异性、高灵敏度的检测肺炎克雷伯杆菌。