公开(公告)号：CN117187173A

公开(公告)日：2023-12-08

申请号：CN202311209202.2

申请日：2023-09-19

申请人： 江苏农牧科技职业学院

发明人： 曹海月 ,  朱善元 ,  何正东 ,  王健 ,  段修军 ,  孙国波 ,  杨震飞 ,  李欣 ,  卞元元 ,  樊圣博

IPC分类号： C12N5/077 ,  A01N1/02

摘要： 本发明提供一种鹅原代成肌细胞的培养方法，涉及细胞培养领域。该培养方法，包括选取孵化14‑15天的鹅卵，从中分离出肌肉，然后使用PBS清洗、破碎、离心取用沉淀，接着使用胰蛋白酶作用在沉淀上使其重悬，最后离心，使用GM重悬细胞；使用FBS润湿离心管，然后依次沿管壁加入3ml 60％及20％Percoll溶液，并加入上述所得物，接着离心处理，从两液面交界处分离目标细胞，然后使用GM培养；细胞分布在培养瓶底部面积不小于80％时，加入胰蛋白酶，并且使用机械的方式使得细胞脱落，经过离心纯化后再次培养；将上述中的再次培养细胞移至冻存管，最后放到液氮罐中保存。优化了培养体系，使细胞营养成分更为完善，活力增强。