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公开(公告)号：CN107034294A
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201710406642.5
申请日：2017-06-02
摘要： 本发明提供一种检测粉红聚端孢菌（Trichothecium roseum）的方法，属于生物技术领域。该检测方法，包括以待测样品的基因组DNA为模板，以TR‑ITS‑FP和TR‑ITS‑RP为引物，以TR‑ITS‑P为TaqMan探针进行实时荧光PCR反应的步骤；当初始循环数≤35时，判定待测样品为粉红聚端孢菌；其中TR‑ITS‑FP的序列如SEQ ID NO:1所示，TR‑ITS‑RP的序列如SEQ ID NO:2所示，TR‑ITS‑P的序列如SEQ ID NO:3所示。本发明检测方法，能够快速、灵敏、准确地对水果和蔬菜等寄主进行粉红聚端孢菌的检测。
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公开(公告)号：CN106701970A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201710046559.1
申请日：2017-01-22
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 , 南京农业大学
摘要： 本发明提供一种鉴定苹果上三种葡萄座腔菌的分子生物学方法，属于生物技术领域。一种鉴定苹果上三种葡萄座腔菌的分子生物学方法，包括以属于葡萄座腔菌属的待检菌株DNA为模板，采用引物EF1‑S和EF1‑A进行PCR扩增的步骤；若扩增产物仅含有230‑250bp的DNA片段，则待检菌株为葡萄座腔菌；若扩增产物仅含有140‑160bp的DNA片段，则待检菌株为苹果壳色单隔孢溃疡病菌；若扩增产物仅含有170‑180bp的DNA片段，则待检菌株为钝葡萄座腔菌；所述引物EF1‑S和EF1‑A的序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。本发明鉴定方法，简便快捷、特异性高、通用性好。
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公开(公告)号：CN103911457B
公开(公告)日：2016-01-20
申请号：CN201410162606.5
申请日：2014-04-22
申请人： 南京林业大学 , 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明提供鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物及其检测方法，涉及生物技术领域。鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两条单链DNA分子组成；所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，可以快速、准确、高效、可靠地对成虫、蛹、幼虫和卵进行鉴定，判别是否为美国白蛾。本发明方法的特异性强，可以将美国白蛾与其他形态近似种区分开来。本发明方法灵敏度高，检出最低限可以达到0.25pg/μl总DNA。
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公开(公告)号：CN101824485B
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN200910264108.0
申请日：2009-12-30
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要： 本发明提供一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法，属于生物技术领域。试剂盒包括引物CPSMVf和CPSMVr；CPSMVf为5’-ACACARGTNMGNCCNGATAC-3’，R＝A或G，N＝I，M＝A或C；CPSMVr为5’-GCTACNGGACTRCTRCTCA-3’，N＝I，R＝A或G。检测步骤：提取样品RNA，以CPSMVr为引物进行反转录反应；以反转录产物为模板，CPSMVf和CPSMVr为引物进行PCR反应，并进行电泳，若样品RNA在356bp处有特异性扩增条带，则该样品感染了CPSMV。该方法具有快速、操作简便，特异性好、重复性高等优点。
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公开(公告)号：CN101818211B
公开(公告)日：2012-03-28
申请号：CN200910263098.9
申请日：2009-12-16
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要： 本发明涉及豇豆重花叶病毒的分子检测方法，属于生物技术领域。该方法包括如下步骤：获得病毒粗提液；制备免疫捕获PCR管；释放免疫捕获PCR管中的豇豆重花叶病毒RNA并以其为模板，以序列为：5’-GGCTTCTGCAGGTGTTCCAA-3’的CPSMVR为引物进行反转录反应，得到反转录产物；以反转录产物为模板，正向引物5’-GGTCAATCCCGGCATTATTG-3’，反向引物CPSMVR，Taq Man探针CPSMVPro 5’FAM-TGTAGCACAATCAGGGCAAACACAGCA-TAMRA 3’，进行实时荧光PCR反应；初始循环数≤35，表示样品感染了豇豆重花叶病毒。
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公开(公告)号：CN104178576A
公开(公告)日：2014-12-03
申请号：CN201410447844.0
申请日：2014-09-04
CPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12Q2600/16
摘要： 本发明提供一种检测或辅助检测疫霉属菌的方法，涉及生物技术领域。本发明方法包括如下步骤：将疫霉菌属各菌的DNA条形码序列进行多重序列比对，找出每个种的特异性碱基位点，同时得到一致性序列；所述每个种的特异性碱基位点包括差异性碱基位点、SNP位点；将待测菌的DNA条形码序列与一致性序列进行比对，调整长度得到定位序列；将定位序列与每个种的特异性碱基位点进行比对，对待测菌与各种的碱基相似度进行打分，取最大值，待测菌隶属于最大值对应的种。本发能够鉴定疫霉属菌各菌，操作简单、准确性高、耗时短、特异性好。
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公开(公告)号：CN103911457A
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201410162606.5
申请日：2014-04-22
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q2563/107
摘要： 本发明提供鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物及其检测方法，涉及生物技术领域。鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，由一个引物对和一个探针组成；所述引物对由SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示的两条单链DNA分子组成；所述探针的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示。本发明鉴定或辅助鉴定美国白蛾的组合物，可以快速、准确、高效、可靠地对成虫、蛹、幼虫和卵进行鉴定，判别是否为美国白蛾。本发明方法的特异性强，可以将美国白蛾与其他形态近似种区分开来。本发明方法灵敏度高，检出最低限可以达到0.25pg/μl总DNA。
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公开(公告)号：CN101818211A
公开(公告)日：2010-09-01
申请号：CN200910263098.9
申请日：2009-12-16
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要： 本发明涉及豇豆重花叶病毒的分子检测方法，属于生物技术领域。该方法包括如下步骤：获得病毒粗提液；制备免疫捕获PCR管；释放免疫捕获PCR管中的豇豆重花叶病毒RNA并以其为模板，以序列为：5’-GGCTTCTGCAGGTGTTCCAA-3’的CPSMVR为引物进行反转录反应，得到反转录产物；以反转录产物为模板，正向引物5’-GGTCAATCCCGGCATTATTG-3’，反向引物CPSMVR，Taq Man探针CPSMVPro 5’FAM-TGTAGCACAATCAGGGCAAACACAGCA-TAMRA 3’，进行实时荧光PCR反应；初始循环数≤35，表示样品感染了豇豆重花叶病毒。
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公开(公告)号：CN101928779B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201019026063.3
申请日：2010-02-08
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要： 本发明涉及一种油菜茎基溃疡病菌实时荧光PCR分子检测试剂盒，包含基因表达通用混合试剂、ddH2O、探针与引物混合物及阳性对照。探针与引物混合物包含5μmol·L-1的LMpro探针、18μmol·L-1的LMf上游引物和18μmol·L-1的LMr下游引物；阳性对照为浓度为100ng/μL的油菜茎基溃疡病菌DNA溶液。本试剂盒可直接对油菜籽或植株病残体检测，快速、灵敏、准确、重复性好，尤其可用于检测病原菌含量较低的样品，特别适合对进出境油菜籽等十字花科作物的种子、植株及病残体中油菜茎基溃疡病菌的快速检测，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101824485A
公开(公告)日：2010-09-08
申请号：CN200910264108.0
申请日：2009-12-30
申请人： 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
摘要： 本发明提供一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法，属于生物技术领域。试剂盒包括引物CPSMVf和CPSMVr；CPSMVf为5’-ACACARGTNMGNCCNGATAC-3’，R＝A或G，N＝I，M＝A或C；CPSMVr为5’-GCTACNGGACTRCTRCTCA-3’，N＝I，R＝A或G。检测步骤：提取样品RNA，以CPSMVr为引物进行反转录反应；以反转录产物为模板，CPSMVf和CPSMVr为引物进行PCR反应，并进行电泳，若样品RNA在356bp处有特异性扩增条带，则该样品感染了CPSMV。该方法具有快速、操作简便，特异性好、重复性高等优点。
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