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公开(公告)号：CN106520913B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201610844180.0
申请日：2016-09-22
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12Q1/37
摘要： 本发明属于生物医学领域中的蛋白质检测领域，具体涉及一种基于酶切循环放大的石墨烯氧化物‑DNA传感器及其检测凝血酶的方法。主要包括：1)制备石墨烯氧化物；2)把FAM标记的TBA核酸适配体加入到氨基活化的石墨烯氧化物上；3)加入不同浓度的凝血酶，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记荧光的强度的变化，进行检测。本发明利用石墨烯氧化物淬灭荧光的特性，采用核酸外切酶Ⅲ识别凝血酶单链核酸适配体(TBA)，将其水解释放凝血酶，从而实现凝血酶循环利用，荧光信号逐渐增强，能高灵敏度、快速、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过共价结合和加入聚乙二醇的方法避免非特异性吸附，将石墨烯氧化物‑核酸适配体传感器对凝血酶检测限提高至0.024pM。
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公开(公告)号：CN105200119B
公开(公告)日：2019-04-02
申请号：CN201510687206.0
申请日：2015-10-22
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12Q1/34
摘要： 本发明属于生物医学领域，公开了一种基于石墨烯氧化物传感器及其制备方法和应用，具体涉及一种基于Tween 80修饰的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器及其检测凝血酶的方法本发明的技术方案主要包括：1）制备石墨烯氧化物；2）把石墨烯氧化物加入到Tween 80通过自组装修饰后的Au NP标记的核酸适配体上；3）加入不同浓度的凝血酶，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记AuNP的紫外吸收强度的变化，进行检测。本发明充分利用石墨烯氧化物的特性，采用AuNP标记的核酸适配体序列与凝血酶特异性结合，通过AuNP紫外吸收值的变化，能高灵敏度、无标记、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过加入Tween 80，将石墨烯氧化物‑核酸适配体传感器对凝血酶检测限提高至0.005 nM。
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公开(公告)号：CN109116040A
公开(公告)日：2019-01-01
申请号：CN201810952103.6
申请日：2018-08-21
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于生物分子检测方法领域，具体涉及一种基于双巯基核酸适配体检测可卡因的方法。本发明检测可卡因的方法具体为：将DNA序列1溶液与DNA序列2溶液混合，水浴培养，得到双巯基核酸适配体1溶液；MoS2@AuNPs表面固定双巯基核酸适配体1；加入可卡因溶液，得到可卡因溶液1；加入核酸适配体2，得到可卡因溶液2；测定步骤可卡因溶液2的荧光强度，计算其荧光增长率，建立荧光增长率与可卡因浓度之间的线性回归方程；测定待测可卡因溶液的浓度。本发明采用MoS2@AuNPs-双巯基核酸适配体1、核酸适配体2与可卡因形成一个类似于三明治的结构，可放大荧光信号，便于检测体系捕捉并检测，达到快速、准确、特异性检测待测物可卡因的效果。
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公开(公告)号：CN107748148A
公开(公告)日：2018-03-02
申请号：CN201710784190.4
申请日：2017-09-04
申请人： 江苏大学
IPC分类号： G01N21/64
CPC分类号： G01N21/6428 , G01N2021/6432
摘要： 本发明基于石墨烯氧化物双氨基固定多T序列检测汞离子的方法，属于环境检测领域中重金属的生物学检测方法。先利用NHS/EDC对GO进行活化,暴露出GO表面的羧基，以利于DNA序列的结合，加入双氨基的多T部分双链序列和活化GO，使得双氨基的多T序列固定化结合在GO表面。加入不同浓度的Hg2+，检测荧光强度，通过荧光强度的变化来分析汞离子浓度。本发明充分利用活化氧化石墨烯表面羧基高效固定双氨基修饰的多T序列，汞离子能与多T序列形成-T-Hg2+-T-配对，导致DNA序列构象变化，荧光强度发生相应变化。汞离子加入的量与荧光变化值呈正相关，基于此检测汞离子浓度，提高了对汞离子检测的信噪比。
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公开(公告)号：CN106990081A
公开(公告)日：2017-07-28
申请号：CN201710230043.2
申请日：2017-04-10
申请人： 江苏大学
IPC分类号： G01N21/64
CPC分类号： G01N21/6486
摘要： 本发明涉及一种基于石墨烯氧化物传感器及其对Hg2+检测的方法，具体涉及一种基于特异性的核酸适配体结合石墨烯氧化物的传感器及其检测重金属Hg2+的方法，属于重金属检测技术领域；本发明把Green I标记的多T核酸适配体通过物理吸附的方式结合石墨烯氧化物上，制备检测重金属Hg2+的传感器，加入不同浓度的Hg2+，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记荧光的强度的变化，并通过氨基化固定提高检测信号从而提高检测灵敏性；本发明充分利用石墨烯氧化物淬灭荧光的特性，采用Green I标记的核酸适配体序列与Hg2+特异性作用，通过Green I荧光的淬灭与恢复，能高灵敏度、低成本地实现Hg2+的检测。
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公开(公告)号：CN106854676A
公开(公告)日：2017-06-16
申请号：CN201611222597.X
申请日：2016-12-27
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： C12Q1/683 , C12Q2563/107
摘要： 本发明属于生物医学领域中的核酸检测方法，涉及一种基于酶Hpa II处理的MoS2传感器检测SNP的方法。包括：(1)使用SYBR Green I对两种双链DNA进行染色；(2)使用MoS2对DNA进行淬灭，测荧光强度；(3)向猝灭后的DNA中加入Hpa II，37下℃温育4h，测荧光强度；(4)比较酶切前后两种DNA的比值变化，进行SNP鉴定。本发明充分利用结合SYBR GreenI的两种DNA被酶Hpa II酶处理，Hpa II酶能特异性切割…C↓CGG….…GGC↑C…。完全配对的DNA会被切割成两段更短的双链DNA，错配的DNA虽然不被切割，仍为一条双链，但会受到一定的损伤，两者荧光强度会有不同程度的降低。完全配对的DNA与错配DNA单个碱基的差别会由于配对DNA链变短而更加明显，从而加大了对SNP的精确程度，提高了检测的灵敏性。
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公开(公告)号：CN105200119A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510687206.0
申请日：2015-10-22
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12Q1/34
摘要： 本发明属于生物医学领域，公开了一种基于石墨烯氧化物传感器及其制备方法和应用，具体涉及一种基于Tween 80修饰的石墨烯氧化物——核酸适配体传感器及其检测凝血酶的方法本发明的技术方案主要包括：1）制备石墨烯氧化物；2）把石墨烯氧化物加入到Tween 80通过自组装修饰后的Au NP标记的核酸适配体上；3）加入不同浓度的凝血酶，通过石墨烯氧化物表面吸附的核酸适配体标记AuNP的紫外吸收强度的变化，进行检测。本发明充分利用石墨烯氧化物的特性，采用AuNP标记的核酸适配体序列与凝血酶特异性结合，通过AuNP紫外吸收值的变化，能高灵敏度、无标记、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过加入Tween 80，将石墨烯氧化物-核酸适配体传感器对凝血酶检测限提高至0.005nM。
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公开(公告)号：CN109116040B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201810952103.6
申请日：2018-08-21
申请人： 江苏大学
摘要： 本发明属于生物分子检测方法领域，具体涉及一种基于双巯基核酸适配体检测可卡因的方法。本发明检测可卡因的方法具体为：将DNA序列1溶液与DNA序列2溶液混合，水浴培养，得到双巯基核酸适配体1溶液；MoS2@AuNPs表面固定双巯基核酸适配体1；加入可卡因溶液，得到可卡因溶液1；加入核酸适配体2，得到可卡因溶液2；测定步骤可卡因溶液2的荧光强度，计算其荧光增长率，建立荧光增长率与可卡因浓度之间的线性回归方程；测定待测可卡因溶液的浓度。本发明采用MoS2@AuNPs‑双巯基核酸适配体1、核酸适配体2与可卡因形成一个类似于三明治的结构，可放大荧光信号，便于检测体系捕捉并检测，达到快速、准确、特异性检测待测物可卡因的效果。
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公开(公告)号：CN105969865B
公开(公告)日：2020-01-24
申请号：CN201610335958.5
申请日：2016-05-20
申请人： 江苏大学
IPC分类号： C12Q1/6825
摘要： 本发明属于生物医学领域中核酸的检测方法，具体涉及一种基于MoS2传感器及其检测SNPs的方法。本发明的技术方案主要包括：1）制备MoS2；2）制备MoS2‑AuNPs复合物；3）把SYBR Green I插入双链DNA后，物理吸附到MoS2或固定化到MoS2‑AuNPs上；4）测量双链DNA前后的荧光变化，鉴定出SNPs。本发明充分利用MoS2和MoS2‑‑AuNPs淬灭荧光的特性，采用SYBR Green I插入到双链DNA中，通过DNA淬灭前后荧光变化，实现无标记、高灵敏度、快速、低成本地检测SNPs。
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公开(公告)号：CN105651999B
公开(公告)日：2018-02-27
申请号：CN201610113606.5
申请日：2016-02-29
申请人： 江苏大学
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/533
摘要： 本发明涉及一种基于二硫化钼的传感器及其制备方法和应用，属于生物医学领域中的蛋白质检测方法；本发明的技术方案主要包括：首先制备MoS2‑AuNP复合物；再合成凝血酶的核苷酸适配体；将合成的核苷酸适配体加入到MoS2‑AuNP的水溶液中，再加入Tween80得到混合溶液，室温下反应30min后，将混合溶液在70℃水浴加热2.5h，10000r离心15min，然后将沉淀分散于0.1M PBS中；即制备成为本发明所述的传感器；本发明充分利用MoS2‑‑AuNP淬灭荧光的特性，采用FAM标记的核酸适配体序列与凝血酶特异性结合，通过FAM荧光的淬灭与恢复，能高灵敏度、快速、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过加入吐温80，将MoS2‑AuNP‑核酸适配体传感器对凝血酶实际检测限提高至0.4pM。
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