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公开(公告)号：CN116411014A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310016865.6
申请日：2023-01-06
申请人： 江苏师范大学
摘要： 一种莱茵衣藻通用表达质粒pHyg‑P2A‑3HA载体及其构建方法和应用，其核苷酸序列如SEQID.No.1所示；pHyg‑P2A‑3HA载体包括TUB2启动子、潮霉素B(Hyg+)筛选基因、自剪切多肽P2A、目的基因插入位点EcoRV、3’末端的3×HA标签和rbcS2终止子；构建方法包括以下步骤：构建表达质粒pHyg‑P2A‑3HA载体的骨架；构建含自剪切多肽P2A的序列片段；将P2A序列片段与质粒骨架结构片段进行重组构建pHyg‑P2A‑3HA质粒。本发明不仅可实现抗性蛋白与目的蛋白相偶联，提高阳性转化子的获得率，还能排除同一阅读框内抗性蛋白的干扰，方便研究目的蛋白结构、定位与功能。
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公开(公告)号：CN118272395A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410555238.4
申请日：2024-05-07
申请人： 江苏师范大学
IPC分类号： C12N15/31 , C07K14/405 , C12N15/87 , C12N1/13 , C12R1/89
摘要： Aida基因在莱茵衣藻对铜离子胁迫耐受性中的应用，Aida基因的核苷酸序列如SEQ ID No 1所示，其编码区的核苷酸序列如SEQ ID No 2所示；Aida基因编码的Aida蛋白质氨基酸序列如SEQ ID No 3所示。本发明突变Aida基因后所获得的莱茵衣藻细胞株，经铜离子生长曲线及吸附效率的测定，发现突变型藻株的生长速率更快、吸附效率更高，且具有较高的铜离子耐受性。本发明为后续深入研究Aida基因如何影响衣藻内部各种氧化应激反应及金属转运、代谢相关蛋白的表达与活性及相关胁迫细胞器功能提供了便利，后期将为莱茵衣藻重金属铜代谢机制的理论研究及重金属生物修复的应用研究奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN118406700A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410555248.8
申请日：2024-05-07
申请人： 江苏师范大学
IPC分类号： C12N15/31 , C07K14/405 , C12N15/87 , C12N1/13 , C12R1/89
摘要： CYP720B1基因在莱茵衣藻对铜离子胁迫耐受性中的应用，CYP720B1基因的核苷酸序列如SEQ ID No 1所示，其编码区的核苷酸序列如SEQ ID No 2所示；CYP720B1基因编码的CYP720B1蛋白质氨基酸序列如SEQ ID No 3所示。本发明突变CYP720B1基因后所获得的莱茵衣藻细胞株，经铜离子生长曲线及吸附效率的测定，发现突变型藻株的生长速率更快、吸附效率更高，且具有较高的铜离子耐受性。本发明为后续深入研究CYP720B1基因如何影响衣藻内部各种氧化应激反应及金属转运、代谢相关蛋白的表达与活性及相关胁迫细胞器功能提供了便利，后期将为莱茵衣藻重金属铜代谢机制的理论研究及重金属生物修复的应用研究奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN117843774A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202410030498.X
申请日：2024-01-09
申请人： 江苏师范大学
IPC分类号： C07K16/14 , C07K14/405 , G01N33/68 , G01N33/58
摘要： 一种莱茵衣藻NPHP8蛋白的兔多克隆抗体及其制备方法和应用，NPHP8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备方法：分析与设计莱茵衣藻NPHP8蛋白抗原表位，选择1489‑1502aa合成多肽片段RVSDYGLAADTRDQ‑C，选择1693‑1705aa合成多肽片段C‑RSRYGAETELSLE；将合成的两种多肽片段进行混合，作为抗原免疫兔子，将获得的抗血清亲和纯化获得NPHP8兔多克隆抗。该兔多克隆抗体既可进行免疫荧光IF来检测莱茵衣藻NPHP8蛋白，特异性标记纤毛过渡区以及多个蛋白共定位分析；也可通过免疫印迹WB方法对莱茵衣藻NPHP8蛋白进行定性与定量分析。
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