IFN-β1编码基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN108239620A

    公开(公告)日:2018-07-03

    申请号:CN201611216435.5

    申请日:2016-12-26

    IPC分类号: C12N5/071 C12N7/00 C12R1/93

    摘要: 本发明涉及IFN-β1编码基因缺失的MDCK细胞株及其构建方法和应用,属于生物技术及兽用生物制品工程技术领域。该名称为MDCK-Sus-KO-IFN-β1的细胞株于2016年11月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称为CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.13288,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。本发明通过敲除MDCK细胞中的IFN-β1编码基因,从而去除细胞的天然免疫信号分子,可以显著提高禽流感病毒在MDCK细胞中的增殖效率。该细胞株可以用于禽流感病毒增殖细胞克隆。

    无血清培养基及其用途和一种猪瘟病毒的培养方法

    公开(公告)号:CN104278009B

    公开(公告)日:2017-11-17

    申请号:CN201410467191.2

    申请日:2014-09-12

    IPC分类号: C12N5/071 C12N7/00 C12R1/93

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及兽用生物制品工程技术领域,更为具体的说是涉及无血清培养及其用途和应用这些培养基的猪瘟病毒的培养方法。本发明以MEM为基础培养基,通过对猪睾丸细胞以及猪瘟病毒的生长、增殖特征研究,利用在基础培养基内添加不同成分,分别得到一系列的猪睾丸细胞无血清培养基、以及不同生长阶段的猪瘟病毒增殖无血清培养基,从而既避免了BVDV及其抗体可能产生的污染风险,同时可以实现ST细胞贴壁生长,且生长迅速、细胞面完整,个体饱满,可以长期传代培养。

    用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用

    公开(公告)号:CN104404002B

    公开(公告)日:2017-06-30

    申请号:CN201410766884.1

    申请日:2014-12-12

    IPC分类号: C12N7/00

    摘要: 本发明提供用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物及其应用,属于生物技术领域。用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物,活性成分为甲基‑β‑环糊精和吐温‑80。本发明还提供制备猪圆环病毒2型病毒液的方法,宿主细胞在接种猪圆环病毒2型之前,采用所述组合物处理1‑6h。本发明用于提高猪圆环病毒2型感染效率的组合物,能够显著提高猪圆环病毒2型对PK‑15细胞的感染效率。本发明制备猪圆环病毒2型病毒液的方法,仅仅经过5代培养,每毫升病毒液的滴度就达到了107.5TCID50。

    搅拌、通气及细胞过滤一体化生物反应器

    公开(公告)号:CN102978113B

    公开(公告)日:2014-06-11

    申请号:CN201110261162.7

    申请日:2011-09-06

    IPC分类号: C12M3/02

    摘要: 本发明涉及一种适用于动物细胞的自悬浮培养或者是微载体悬浮培养的生物反应器。为了找到一种搅拌、通气及细胞过滤一体化生物反应器,从而消除搅拌式生物反应器中搅拌桨和深层通气对所培养的动物细胞造成的剪切伤害,同时无需外接设备,就可以方便的完成培养过程中的换液、清洗、消化。本发明公开了一种搅拌、通气及细胞过滤一体化生物反应器,包括反应容器、反应器顶盖、反应器搅拌轴,还包括有一个带孔过滤套筒,所述过滤套管悬置于反应容器中,将反应容器区分为搅拌、通气、过滤一体化腔室及细胞培养腔室。从而将搅拌、通气及培养物过滤三方面工艺操作合为一体,且位于生物反应器内部,统一整体灭菌,无外接设备,操作简单,安全高效。

    IBDV无血清微载体悬浮培养增殖的方法

    公开(公告)号:CN102268411A

    公开(公告)日:2011-12-07

    申请号:CN201110231805.3

    申请日:2011-08-15

    IPC分类号: C12N7/00

    摘要: 本发明提供了一种IBDV无血清微载体悬浮培养增殖的方法,包括下列步骤:1)Vero细胞的无血清培养的驯化;2)IBDV病毒增殖:将驯化的细胞接种到含0.25%的乳清蛋白水解物的无血清培养基,待细胞粘附到微载体并开始生长时接种IBDV病毒,90h收获病毒。本发明对从ATCC引进的Vero细胞进行驯化,降血清的培养,最终获得无血清微载体培养条件下的Vero细胞,同时改进IBDV病毒增殖时培养基成分,减少外源性病毒的影响,提高IBDV在无血清微载体培养条件下的病毒效价。通过优化病毒繁殖培养基增殖的IBDV病毒效价高于未优化培养基增殖的IBDV和采用鸡胚成纤维细胞增殖的IBDV病毒效价;与Vero细胞有血清培养的IBDV相当;免疫原性实验表明:该病毒的免疫原性强,适合作为疫苗生产。

    高效增殖杆状病毒的昆虫细胞株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN107488633B

    公开(公告)日:2021-04-16

    申请号:CN201710122391.8

    申请日:2017-03-03

    摘要: 本发明公开了一种高效增殖杆状病毒的昆虫细胞株,该昆虫细胞株名称为Sf9‑op‑BmBDV‑NS1,于2016年11月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.13289,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。该细胞株能够显著提高外源蛋白的表达量,其表达的外源病毒蛋白或病毒样颗粒产物具有较强的生物活性,符合疫苗的生产要求;经过外源病毒检测、支原体检测、无菌检测、外源因子检测后,该细胞株的各种指标均符合疫苗生产用细胞基质的要求;可应用于杆状病毒和疫苗的生产。

    动物用粘膜靶向免疫增强剂及其在兽用疫苗中的应用

    公开(公告)号:CN108014333A

    公开(公告)日:2018-05-11

    申请号:CN201711324750.4

    申请日:2017-12-13

    IPC分类号: A61K39/39 A61P37/04

    摘要: 本发明涉及生物医药领域,具体涉及动物用粘膜靶向免疫增强剂及其在兽用疫苗中的应用。针对目前现有技术中存在的问题,以及对于理想兽用疫苗的期待,本发明公开了一种动物用粘膜靶向免疫增强剂,含有0.5μg~500μg/mL的CpG、0.1μg~1mg/mL的α‑GC、0.1μg~3mg/mL的Poly(I:C)、1μg~5mg/mL的PLGA、0.1μg~5mg/mL的PEI、1μg~10mg/mL壳聚糖。同时还公开了该动物用粘膜靶向免疫增强剂在兽用疫苗中的应用可能及应用方法。从而能够产生良好的粘膜免疫,同时缩短免疫窗口期,有效降低抗原用量和产生消除性免疫。