公开(公告)号：CN114045293B

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202111260093.8

申请日：2021-10-28

申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 ,  江西科技师范大学

发明人： 张焕欣 ,  张哲 ,  曾斌 ,  陈梓铭 ,  李玉珍 ,  陈天铭 ,  范俊侠

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12N15/55 ,  C12N1/15 ,  C12P17/06 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap1、方法及应用，Aokap1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明通过敲除Aokap1基因可以提高米曲霉曲酸产量，这对于构建米曲霉曲酸高产菌株提供了新靶点和新途径。

公开(公告)号：CN114045293A

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN202111260093.8

申请日：2021-10-28

申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 ,  江西科技师范大学

发明人： 张焕欣 ,  张哲 ,  曾斌 ,  陈梓铭 ,  李玉珍 ,  陈天铭 ,  范俊侠

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12N15/55 ,  C12N1/15 ,  C12P17/06 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap1、方法及应用，Aokap1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明通过敲除Aokap1基因可以提高米曲霉曲酸产量，这对于构建米曲霉曲酸高产菌株提供了新靶点和新途径。

公开(公告)号：CN113584023B

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202110790343.2

申请日：2021-07-13

申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 ,  江西科技师范大学

发明人： 张焕欣 ,  张哲 ,  曾斌 ,  李玉珍 ,  陈梓铭 ,  范俊侠

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了金属离子诱导的米曲霉基因启动子、其制备方法及应用。米曲霉金属离子诱导基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。该启动子受锌、锰离子诱导表达。在锌、锰离子诱导浓度下，它们对米曲霉无生长抑制，反而促进米曲霉生长。而且诱导物ZnSO4和MnSO4价格低廉，有利于在工业生产中广泛使用。

公开(公告)号：CN113584023A

公开(公告)日：2021-11-02

申请号：CN202110790343.2

申请日：2021-07-13

申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 ,  江西科技师范大学

发明人： 张焕欣 ,  张哲 ,  曾斌 ,  李玉珍 ,  陈梓铭 ,  范俊侠

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了金属离子诱导的米曲霉基因启动子、其制备方法及应用。米曲霉金属离子诱导基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。该启动子受锌、锰离子诱导表达。在锌、锰离子诱导浓度下，它们对米曲霉无生长抑制，反而促进米曲霉生长。而且诱导物ZnSO4和MnSO4价格低廉，有利于在工业生产中广泛使用。

公开(公告)号：CN113403208A

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN202110661531.5

申请日：2021-06-15

申请人： 江西科技师范大学 ,  江西省农业科学院园艺研究所

发明人： 张哲 ,  张焕欣 ,  曾斌 ,  李玉珍 ,  陈梓铭 ,  范俊侠

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了高效鉴定米曲霉CRISPR/Cas9突变体的方法，包括：1)构建基于AMA1自主复制质粒的米曲霉基因编辑系统；2)利用米曲霉曲酸合成基因评估步骤1)构建的米曲霉基因编辑系统，所述米曲霉曲酸合成基因选自kojA、kojR和kojT；3)将kojA的sgRNA和PAM序列置于DsRed的起始密码子后面，构建含有kojA的sgRNA和PAM序列的非功能性DsRed，以此评估非功能性DsRed作为报告基因用于筛选米曲霉CRISPR/Cas9突变体。本发明实现了从米曲霉CRISPR/Cas9突变株中批量的初步筛选突变体，避免了大量提取DNA的繁琐，无需进行批量的米曲霉转化子测序筛选。

公开(公告)号：CN117025638A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202310895514.7

申请日：2023-07-20

申请人： 江西科技师范大学

发明人： 张哲 ,  张焕欣 ,  邱婷 ,  曾斌 ,  陈梓铭 ,  李玉珍

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap3、方法及应用，Aokap3基因是一个提高米曲霉曲酸含量的新基因，通过破坏Aokap3基因编码蛋白的生物学功能能够显著提高米曲霉曲酸产量。本发明发现米曲霉Aokap3基因中以第390位至第409位的核苷酸序列作为靶序列，能够高效实现Aokap3基因的定点敲除，并且在如SEQ ID NO.2所示序列的第390位至第409位发生插入或缺失均会导致Aokap3基因的编码蛋白被破坏，提高米曲霉曲酸产量，经实验证明通过敲除Aokap3基因可制备高产曲酸的工程菌株，在曲酸的生产中具有十分重要的应用价值。

公开(公告)号：CN118420733A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202310429320.8

申请日：2023-04-21

申请人： 江西科技师范大学

发明人： 张哲 ,  张焕欣 ,  曾斌 ,  陈梓铭 ,  陈天铭 ,  李玉珍 ,  范俊侠

IPC分类号： C07K14/38 ,  C12N1/15 ,  C12N15/31 ,  C12N15/113 ,  C12N15/80 ,  C12P17/06 ,  C12R1/69

摘要： 本发明提供了米曲霉AozfA基因及其编码蛋白与应用。本发明发现米曲霉AozfA基因及其编码蛋白参与调控曲酸合成，通过破坏AozfA基因编码蛋白的生物学功能能够显著提高米曲霉曲酸产量。经实验证明通过敲除AozfA基因可制备高产曲酸的工程菌株，在曲酸的生产中具有十分重要的应用价值。本发明进一步利用CRISRP/Cas9技术进行基因组靶向修饰AozfA基因，实现了高效的AozfA的定点敲除。