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公开(公告)号：CN114045293B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202111260093.8
申请日：2021-10-28
申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 , 江西科技师范大学
摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap1、方法及应用，Aokap1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明通过敲除Aokap1基因可以提高米曲霉曲酸产量，这对于构建米曲霉曲酸高产菌株提供了新靶点和新途径。
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公开(公告)号：CN114045293A
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202111260093.8
申请日：2021-10-28
申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 , 江西科技师范大学
摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap1、方法及应用，Aokap1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明通过敲除Aokap1基因可以提高米曲霉曲酸产量，这对于构建米曲霉曲酸高产菌株提供了新靶点和新途径。
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公开(公告)号：CN110592073A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910911608.2
申请日：2019-09-25
申请人： 江西科技师范大学
摘要： 本发明提供了利用一种可以在Aspergillus属真菌内进行自主复制的穿梭载体，并通过组成型启动子PgpdA启动表达cas9，定向遗传改造米曲霉基因的方法，该方法消除了载体插入位点和培养基组分对cas9表达的影响，提高了基因编辑效率，并且能够产生无标记(Marker-Free)的米曲霉工程菌，免除对转基因的担忧，提高转基因改造米曲霉的实用性。
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公开(公告)号：CN118420733A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202310429320.8
申请日：2023-04-21
申请人： 江西科技师范大学
摘要： 本发明提供了米曲霉AozfA基因及其编码蛋白与应用。本发明发现米曲霉AozfA基因及其编码蛋白参与调控曲酸合成，通过破坏AozfA基因编码蛋白的生物学功能能够显著提高米曲霉曲酸产量。经实验证明通过敲除AozfA基因可制备高产曲酸的工程菌株，在曲酸的生产中具有十分重要的应用价值。本发明进一步利用CRISRP/Cas9技术进行基因组靶向修饰AozfA基因，实现了高效的AozfA的定点敲除。
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公开(公告)号：CN113584023B
公开(公告)日：2023-07-28
申请号：CN202110790343.2
申请日：2021-07-13
申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 , 江西科技师范大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12R1/69
摘要： 本发明提供了金属离子诱导的米曲霉基因启动子、其制备方法及应用。米曲霉金属离子诱导基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。该启动子受锌、锰离子诱导表达。在锌、锰离子诱导浓度下，它们对米曲霉无生长抑制，反而促进米曲霉生长。而且诱导物ZnSO4和MnSO4价格低廉，有利于在工业生产中广泛使用。
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公开(公告)号：CN113584023A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110790343.2
申请日：2021-07-13
申请人： 江西省农业科学院园艺研究所 , 江西科技师范大学
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12R1/69
摘要： 本发明提供了金属离子诱导的米曲霉基因启动子、其制备方法及应用。米曲霉金属离子诱导基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。该启动子受锌、锰离子诱导表达。在锌、锰离子诱导浓度下，它们对米曲霉无生长抑制，反而促进米曲霉生长。而且诱导物ZnSO4和MnSO4价格低廉，有利于在工业生产中广泛使用。
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公开(公告)号：CN113403208A
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110661531.5
申请日：2021-06-15
申请人： 江西科技师范大学 , 江西省农业科学院园艺研究所
摘要： 本发明提供了高效鉴定米曲霉CRISPR/Cas9突变体的方法，包括：1)构建基于AMA1自主复制质粒的米曲霉基因编辑系统；2)利用米曲霉曲酸合成基因评估步骤1)构建的米曲霉基因编辑系统，所述米曲霉曲酸合成基因选自kojA、kojR和kojT；3)将kojA的sgRNA和PAM序列置于DsRed的起始密码子后面，构建含有kojA的sgRNA和PAM序列的非功能性DsRed，以此评估非功能性DsRed作为报告基因用于筛选米曲霉CRISPR/Cas9突变体。本发明实现了从米曲霉CRISPR/Cas9突变株中批量的初步筛选突变体，避免了大量提取DNA的繁琐，无需进行批量的米曲霉转化子测序筛选。
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公开(公告)号：CN117025638A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310895514.7
申请日：2023-07-20
申请人： 江西科技师范大学
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12R1/69
摘要： 本发明提供了提高米曲霉曲酸产量的基因Aokap3、方法及应用，Aokap3基因是一个提高米曲霉曲酸含量的新基因，通过破坏Aokap3基因编码蛋白的生物学功能能够显著提高米曲霉曲酸产量。本发明发现米曲霉Aokap3基因中以第390位至第409位的核苷酸序列作为靶序列，能够高效实现Aokap3基因的定点敲除，并且在如SEQ ID NO.2所示序列的第390位至第409位发生插入或缺失均会导致Aokap3基因的编码蛋白被破坏，提高米曲霉曲酸产量，经实验证明通过敲除Aokap3基因可制备高产曲酸的工程菌株，在曲酸的生产中具有十分重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN118109496A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202311550118.7
申请日：2023-11-21
申请人： 江西科技师范大学
摘要： 本发明提供一种高麦角甾醇含量米曲霉菌株及构建方法，以农杆菌介导转基因技术、基因过表达和组合共过表达策略实现；其主要包含以下步骤：以酵母麦角甾醇合成通路基因为参考序列，鉴定出米曲霉中麦角甾醇生物合成相关基因；分别构建米曲霉麦角甾醇生物合成相关基因的过表达载体；将过表达载体转入农杆菌中，进而转入米曲霉中，成功获得过表达株系；测定获得的米曲霉麦角甾醇合成酶过表达株系的麦角甾醇含量，并进行分析发现AoHmg过表达菌株麦角甾醇含量增加最多；将过表达可以提高麦角甾醇含量的基因组合共同过表达来提高麦角甾醇含量。本发明所制备的米曲霉菌株具备高含量麦角甾醇的特点，以补充目前麦角甾醇产量不足的问题。
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