公开(公告)号：CN118126144A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202410292943.X

申请日：2024-03-14

申请人： 河北平朴生物科技合伙企业(有限合伙)

发明人： 郝威 ,  刘昊 ,  殷休 ,  武子浩 ,  崔孟璞 ,  白东伟 ,  刘金豆 ,  闫烁 ,  孙颖娇 ,  王乐 ,  关磊 ,  刘卿 ,  李允 ,  孟新悦 ,  赵钰涵 ,  郭文 ,  徐玉平 ,  楼素芬 ,  蒋睿峰

IPC分类号： C07K14/33 ,  C07K1/18 ,  C07K1/20 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  A61K38/16 ,  A61K8/64 ,  A61P27/02 ,  A61P21/00 ,  A61P25/00 ,  A61P25/02 ,  A61P9/10 ,  A61P19/00 ,  A61P43/00 ,  A61P25/06 ,  A61P13/10 ,  A61Q19/00

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种A型重组肉毒素的纯化方法。所述纯化方法包括以下步骤：收集发酵液，破碎菌体后，得到破碎液；向破碎液中加入絮凝剂进行澄清，澄清后离心除杂质，得到澄清液；将澄清液加入到离子层析柱中进行离子层析，得到离子层析液；向离子层析液中加入凝血酶进行酶切，得到酶切液；将酶切液加入到疏水层析柱中进行疏水层析，得到疏水层析液；对疏水层析液进行超滤浓缩，得到超滤浓缩液；将超滤浓缩液加入到分子筛层析柱进行分子筛层析，得到纯化的A型重组肉毒素。所述纯化方法与现有技术相比可有效去除杂质蛋白，且不影响轻链和重链的完整性，氨基酸序列覆盖率为100％，也不影响氨基酸序列覆盖率为100％。