公开(公告)号：CN105648032B

公开(公告)日：2019-09-06

申请号：CN201610078469.6

申请日：2016-02-04

Applicant: 河南农业大学 ,  河南科技学院

Inventor： 何松林 ,  王政 ,  贺丹 ,  申萍 ,  李永华 ,  李晓娟

IPC: C12Q1/34

Abstract: 本发明公开一种转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法，将转基因牡丹愈伤组织从培养基中取出，用蒸馏水洗去残留菌体，放入离心管中，加入Buffer A至没过愈伤组织，置于24℃环境中，侵泡1 h，用移液枪将Buffer A吸出，加入Buffer B至没过愈伤组织，置于24℃黑暗环境中染色过夜或数小时，至愈伤组织出现蓝色。本发明将原GUS基因组织化学染色方法中的37℃优化为24℃。将试验筛选得到的增殖生长良好的愈伤组织进行GUS组织化学染色的检测，试验结果成功检测到GUS活性的表达，愈伤组织碎块呈蓝色，表明新生的愈伤组织中存在GUS活性位点。

公开(公告)号：CN105648032A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610078469.6

申请日：2016-02-04

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 何松林 ,  王政 ,  贺丹 ,  申萍 ,  李永华 ,  李晓娟

IPC: C12Q1/34

Abstract: 本发明公开一种转基因牡丹愈伤组织的GUS基因组织化学染色方法，将转基因牡丹愈伤组织从培养基中取出，用蒸馏水洗去残留菌体，放入离心管中，加入Buffer A至没过愈伤组织，置于24℃环境中，侵泡1 h，用移液枪将Buffer A吸出，加入Buffer B至没过愈伤组织，置于24℃黑暗环境中染色过夜或数小时，至愈伤组织出现蓝色。本发明将原GUS基因组织化学染色方法中的37℃优化为24℃。将试验筛选得到的增殖生长良好的愈伤组织进行GUS组织化学染色的检测，试验结果成功检测到GUS活性的表达，愈伤组织碎块呈蓝色，表明新生的愈伤组织中存在GUS活性位点。