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公开(公告)号:CN107365714A
公开(公告)日:2017-11-21
申请号:CN201710687640.8
申请日:2017-08-11
申请人: 河南省农业科学院园艺研究所 , 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要: 本发明公开了一种系统创制不同致病力西瓜枯萎病菌菌株及西瓜抗枯萎病的精准鉴定方法。通过对西瓜枯萎病菌有4个生理小种建立枯萎病菌突变体库、获取枯萎病菌遗传转化突变体、鉴定菌株致病力强弱、筛选不同致病力的突变体菌株等技术手段,分别创制出不同致病力的菌株;抗枯萎病的精准鉴定方法是利用上述所得同一生理小种不同致病力的菌株进行同一材料或品种进行定性抗病测定,又可以对同一材料对某一种生理小种抗性强弱定量抗病测定。运用该本发明方法进行西瓜材料或品种抗枯萎病鉴定,步骤简单、结果直观、一致性和重复性强;本发明方法也可用于其它引起维管束病害的病原菌,加速不同枯萎病性寄主材料和品种抗性鉴定及抗病育种进程。
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公开(公告)号:CN114107371B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202111482446.9
申请日:2021-12-06
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
IPC分类号: C12N15/82 , C12N15/113 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要: 本发明公开CGMMV基因介导转基因烟草方法。针对现有技术不能利用重组质粒构建含CGMMV来源基因片段的具有发卡结构的ihpRNAi植物表达载体并能成功获得抗性烟草的方法的缺陷,本发明首先提供重组质粒pHellsgate2‑N及其构建方法。该重组载体是将CGMMV基因片段与干涉载体pHellsgate2进行重组反应构建获得。本发明还由该重组质粒转化得到的烟草干涉表达ihpRNAi载体及其构建方法。发明还提供CGMMV Helicase基因、完整外壳基因在病毒基因介导抗性烟草培育中的应用,以及经筛选得到的目的片段He1、He2、He3。
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公开(公告)号:CN114150003B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202111482440.1
申请日:2021-12-06
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
IPC分类号: C12N15/40 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要: 本发明公开黄瓜绿斑驳花叶病毒基因间隔区域在抗性烟草培育中的应用。针对现有技术未公开对CGMMV基因间隔区域的注释,也没有构思过从间隔区域筛选目的片段用于抗性烟草培育,本发明提供CGMMV基因间隔区域在介导抗性烟草培育中的应用。本发明筛选出三条CGMMV基因间隔区域片段IR1、IR2、IR3,同时构建嵌合结构IMC,均能成功用于植物干涉载体实现抗性烟草培育。本发明还提供利用这些目的片段介导转基因抗性烟草的完整技术方案。
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公开(公告)号:CN111518958B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202010493617.7
申请日:2020-06-03
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要: 本发明公开了鉴定或辅助鉴定葫芦科作物种传病毒的多重PCR引物对组合物与应用。该鉴定或辅助鉴定葫芦科作物种传病毒的多重PCR引物对组合物可为鉴定或辅助鉴定葫芦科作物5种种传病毒中5种以下病毒的多重PCR引物对组合物,由ZYMV‑FR、MNSV‑FR、CGMMV‑FR、CMV‑FR和SqMV‑FR这5种引物对组成。该多重PCR引物对组合物能在一个PCR体系中特异性地检测ZYMV、MNSV、CGMMV、CMV和SqMV这5种葫芦科作物种传病毒,能准确地鉴定ZYMV、MNSV、CGMMV、CMV和SqMV这五种病毒的任意组合侵染。
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公开(公告)号:CN108680683B
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN201810342366.5
申请日:2018-04-17
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要: 本发明涉及色谱检测领域,具体而言,提供了一种液相色谱法检测果实中类胡萝卜素的流动相配方及果实中类胡萝卜素检测的HPLC方法。所述流动相配方包括流动相A和流动相B,流动相A包括以下体积比的成分:乙腈:甲醇:二氯甲烷:正己烷=(80‑90):(1‑8):(1‑8):(1‑8);流动相B包括以下体积比的成分:乙腈:甲醇:二氯甲烷:正己烷=(50‑60):(5‑15):(15‑20):(15‑20)。该流动相配方对于果实中类胡萝卜素的分离效果好,能用于多种不同果实样品中类胡萝卜素含量和组分的测定,适用于大部分的C18色谱柱,具有通用性强、灵敏、重复性好的优点。
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公开(公告)号:CN110951917A
公开(公告)日:2020-04-03
申请号:CN201911257573.1
申请日:2019-12-10
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要: 本发明涉及一种快速检测瓜类病毒的RNA-RP RT-PCR方法,将感染病毒的瓜类植物叶片采用PBST+2%PVP溶液或0.5%Triton X-405 PBS溶液匀浆,提取样品病毒RNA于上清液中,以此上清液用于一步RT-PCR扩增病毒目标片段,从而检测瓜类病毒。本发明仅需微量样品即可获得足量的RNA模板,用于对瓜类植物中的西瓜、甜瓜、黄瓜和西葫芦及模式植物本生烟进行黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、番木瓜环斑病毒(Papaya ring spot virus,PRSV)和南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)等6种病毒的检测,方法灵敏度高、结果准确,操作简单和快速,提供了瓜类病毒新的检测方法。
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公开(公告)号:CN105331629B
公开(公告)日:2018-10-16
申请号:CN201510694325.9
申请日:2015-10-23
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
摘要: 本发明涉及一种黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染性克隆重组载体、黄化突变体及其构建方法,以黄瓜绿斑驳花叶病毒为材料,将其基因组6.4Kb克隆到植物表达载体pXT1中,获得对寄主植物有高效侵染能力的病毒载体pXT1‑CGMMV,并在此基础上对病毒序列进行单一位点突变,获得一株侵染力较强、能使寄主产生黄化症状的突变载体pCGMMV‑CP‑L25A,该突变体的获得为揭示黄瓜绿斑驳花叶病毒花叶症状的产生机制奠定了基础,也为揭示该病毒各基因的功能提供了新的研究方法。
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公开(公告)号:CN1097921A
公开(公告)日:1995-02-01
申请号:CN94105889.1
申请日:1994-06-01
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
IPC分类号: A01H1/00
摘要: 本发明提供了一种西瓜抗枯萎病早熟品种的选育方法,包括西瓜枯萎病的分离、抗枯萎病鉴定、抗源筛选、选配杂交组合。本发明利用T5—4×MIC为母本,PR2为父本配制郑抗二号西瓜杂交种。该品种为早熟、优质、抗枯萎病,中心糖平均11%,比新红宝高一度。一般亩产3500—4000Kg,经全国区域试验,比对照品种郑杂五号高30%左右。在重茬地连续三年种植时,基本不死苗,而对照品种“郑杂九号”死苗率达30%以上。
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公开(公告)号:CN115976020B
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202211119466.4
申请日:2022-09-14
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
IPC分类号: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H6/82 , A01H5/00
摘要: 本申请提供了一种调控植物蛋白活性的5′UTR序列,所述5′UTR序列的核苷酸序列为SEQ ID NO.3,包括序列为SEQ ID NO.4、5、6的uORF1、uORF2和uORF3以及序列为SEQ ID NO.7的非翻译序列。本申请还提供了包含该5′UTR序列的载体。本申请的5′UTR序列和载体适用于抗病基因的,通过喷施茉莉酸调控抗病基因所编码蛋白的翻译水平,以在防御病害的同时避免没有病害侵染时植物防御反应过度。
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公开(公告)号:CN117088955A
公开(公告)日:2023-11-21
申请号:CN202311240751.6
申请日:2023-09-25
申请人: 中国农业科学院郑州果树研究所
IPC分类号: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/34
摘要: 本发明公开了ClPR1蛋白在提高葫芦科植物抗病毒病方面的应用,属于基因工程领域。本发明通过在葫芦科植物如甜瓜、西瓜中过表达ClPR1蛋白,发现可以显著降低甜瓜、西瓜等葫芦科植物中病毒含量,说明ClPR1蛋白可以提高寄主植物的抗病毒病的能力。因此,ClPR1蛋白及其编码基因可用于农业和生态环境治理所需的抗病毒病植物品种的培育与鉴定,在植物抗病育种领域中具有重要作用。
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