公开(公告)号：CN117646021A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202310874784.X

申请日：2023-07-17

申请人： 河南省农业科学院烟草研究所

发明人： 平文丽 ,  李雪君 ,  孙计平 ,  孙焕 ,  刘伟龙 ,  李丽华 ,  俎焕新 ,  李旭辉 ,  侯咏 ,  张雪珂

IPC分类号： C12N15/82 ,  C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  A01H6/82 ,  A01H5/00

摘要： 本发明属于烟草遗传育种领域，涉及高抗镰刀菌植物的培育，特别是指一种NtWAKL1基因在培育高抗镰刀菌植物中的应用。根据NtWAKL1基因的核苷酸序列筛选基因编辑靶位点的sgRNA序列，并设计sgRNA引物对；通过退火反应获得靶位点的序列，经酶切、连接获得NtWAKL1‑‑pORE‑Cas9载体；NtWAKL1‑pORE‑Cas9载体经农杆菌GV3101介导的遗传转化获得基因编辑株系。经分析，该基因在响应镰刀菌入侵中起到识别细胞壁多糖降解产物作为入侵信号、调控植物与病原互作基因的表达的作用。通过基因编辑敲除该基因、沉默其功能，可以实现提高感病株系对镰刀菌抗性。