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    荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒
    2.
    发明授权
    荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒 失效

    公开(公告)号：CN102181583B

    公开(公告)日：2013-10-16

    申请号：CN201110103579.0

    申请日：2011-04-25

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 刘兴友 ,  刘明成 ,  王丽荣 ,  胡建和

    IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/93

    摘要： 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒。其上下引物及探针的核苷酸序列依次为：5'-AGGTAGTGGTGTTCCTGATAATGAG-3’、5'-ACGCATCTGGGACTGGTTTTC-3'、5'-CCTGGCTTATACCTGGCTTGGCGTCT-3'；并建立起含有上述引物、探针的荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的试剂盒。该试剂盒特异性强，灵敏度高，定量准确，操作简便，用时短，效率高，成本低，可对大量的样品进行检测，能够在短时间内为IB的治疗及预防提供依据；与常规的PCR检测相比，能有效地避免假阳性出现，同时也降低了病毒的检出量，更为灵敏。

    荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒
    3.
    发明公开
    荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒 失效

    公开(公告)号：CN102181583A

    公开(公告)日：2011-09-14

    申请号：CN201110103579.0

    申请日：2011-04-25

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 刘兴友 ,  刘明成 ,  王丽荣 ,  胡建和

    IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/93

    摘要： 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的引物、探针及试剂盒。其上下引物及探针的核苷酸序列依次为：5′-AGGTAGTGGTGTTCCTGATAATGAG-3′、5′-ACGCATCTGGGACTGGTTTTC-3′、5′-CCTGGCTTATACCTGGCTTGGCGTCT-3′；并建立起含有上述引物、探针的荧光定量RT-PCR检测鸭源性冠状病毒的试剂盒。该试剂盒特异性强，灵敏度高，定量准确，操作简便，用时短，效率高，成本低，可对大量的样品进行检测，能够在短时间内为IB的治疗及预防提供依据；与常规的PCR检测相比，能有效地避免假阳性出现，同时也降低了病毒的检出量，更为灵敏。

    鸭源性冠状病毒及其分离培养方法与应用
    4.
    发明公开
    鸭源性冠状病毒及其分离培养方法与应用 失效

    公开(公告)号：CN101906404A

    公开(公告)日：2010-12-08

    申请号：CN201010225577.4

    申请日：2010-07-14

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 刘兴友 ,  姚四新 ,  赵淑秋 ,  刘金华 ,  王宪文 ,  王丽荣 ,  王自良 ,  赵坤 ,  陈仕钧 ,  赵朴

    IPC分类号： C12N7/00 ,  A61K39/215 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  A61P11/00 ,  C12R1/93

    摘要： 本发明涉及鸭源性冠状病毒ZZ2004及其分离培养方法与应用。其微生物保藏编号为CGMCC No.3842；其分离培养方法：无菌条件下采集感染发病的家禽肾脏，加灭菌PBS反复洗涤后，研磨至乳状再加灭菌PBS稀释液后，分装入冻存管，反复冻融数次，过滤除菌，将滤液经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，37℃培养72h，收获尿囊液并连续盲传5代以上，取红细胞凝集试验为阴性的鸡胚尿囊液。本病毒分离株来源于鸡鸭混养的养殖场，与其它禽类的冠状病毒相比，其变异程度大，对动物的感染谱更广，本病毒的发现与研究对于揭示IBV变异规律，区分不同的血清型，制备出防治鸡传染性支气管炎的新型IBV疫苗与药物，有着重要的意义。

    化脓性链球菌细胞壁成分萃取方法
    6.
    发明公开
    化脓性链球菌细胞壁成分萃取方法 无效

    公开(公告)号：CN105779326A

    公开(公告)日：2016-07-20

    申请号：CN201410825937.2

    申请日：2014-12-25

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 董永军 ,  袁清珠 ,  王丽荣

    IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N1/06 ,  C12R1/46

    摘要： 化脓性链球菌细胞壁成分萃取方法，它涉及生物医学技术领域。它的萃取方法为：菌种复活，菌种培养，发酵剂调配，发酵剂消毒灭菌，前发酵，本发酵，分离回收菌体，洗涤菌体，浓缩菌体，灭活菌体，膨化菌体，溶解细菌细胞壁，溶解细菌细胞壁脂质层，溶解洗脱去除细菌蛋白质，洗脱去除脂质成分，分解去除核酸，洗脱去除残余蛋白质，浓缩细菌细胞壁成分，冻干制粉，回收称重，包装出厂。它不仅适用于化脓性链球菌的标准菌株的细胞壁成分萃取也适用于化脓性链球菌的非标准菌株的细胞壁成分萃取，通过加热处理获得的化脓性链球菌细胞壁成分不含活菌并失去感染能力；通过真空干燥获得的化脓性链球菌细胞壁成分后可长期保存备于研究使用。

    一种用鱼腥草药渣发酵物制备饲料添加剂的方法
    9.
    发明公开
    一种用鱼腥草药渣发酵物制备饲料添加剂的方法 无效

    公开(公告)号：CN103583807A

    公开(公告)日：2014-02-19

    申请号：CN201310551000.6

    申请日：2013-11-10

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 姚四新 ,  赵淑秋 ,  刘兴友 ,  欧长波 ,  王丽荣 ,  王宪文 ,  郑玉姝

    IPC分类号： A23K1/14 ,  A23K1/16 ,  A23K1/00

    摘要： 一种用鱼腥草药渣发酵物制备饲料添加剂的方法。本发明的技术方案要点是，一种用鱼腥草药渣发酵物制备饲料添加剂的方法，其特征在于包含如下工艺步骤：①将鱼腥草药渣干燥后粉碎成粉末；②酵母菌的扩大培养，取增菌用液体培养基高压灭菌后于无菌容器内，无菌加入安琪干酵母5-10克/100ml，置30-37℃恒温培养箱培养5-7h；③将扩大培养的酵母菌液加入重量体积分数为：鱼腥草药渣粉末30-60g/100ml、酵母粉1g/100ml、蛋白胨2g/100ml、葡萄糖2g/100ml、混合均匀后继续发酵；④发酵条件为培养温度30-37℃，pH4.0-6.0，培养时间48-72h；⑤发酵结束后，将发酵物干燥，研磨成粉末，辐射灭菌，即完成制备。本方法工艺流程简单，不需要特殊仪器和设备，生产周期短，成本低，适合于工业化生产。

    抗鸭源性冠状病毒ZZ2004单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用
    10.
    发明授权
    抗鸭源性冠状病毒ZZ2004单克隆抗体、杂交瘤细胞株及其应用 失效

    公开(公告)号：CN101993856B

    公开(公告)日：2012-09-19

    申请号：CN201010557051.6

    申请日：2010-11-24

    申请人： 河南科技学院

    发明人： 刘兴友 ,  刘明成 ,  王丽荣

    IPC分类号： C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  C12R1/91

    摘要： 本发明涉及一种杂交瘤细胞株、抗鸭源性冠状病毒ZZ2004单克隆抗体及其应用。本发明通过细胞的融合、筛选和克隆，获得保藏编号为CGMCC NO.4171杂交瘤细胞株，将筛选到的杂交瘤细胞扩大培养，注入经产母鼠腹腔，制备出了高效价的腹水抗体，该抗体能够中和鸭源性冠状病毒；以本发明杂交瘤细胞株制备单克隆抗体成本低、操作简单、生产周期短，生产的抗体含量高、特异性强；该发明为建立鸭源性冠状病毒感染禽类的诊断方法奠定良好的基础，具有重要的经济价值和社会意义。