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公开(公告)号:CN1531590A
公开(公告)日:2004-09-22
申请号:CN01821405.3
申请日:2001-10-26
申请人: 法马西亚公司
CPC分类号: C12N9/0083 , C07K14/38 , C07K16/40 , C12N1/14 , C12N3/00 , C12N9/0004 , C12N2799/026 , C12P33/10
摘要: 本发明涉及新型细胞色素P450样酶(赭曲霉),所述酶分离自赭曲霉孢子mRNA产生的cDNA文库。当编码所述11α羟化酶的cDNA与编码作为电子供体的人氧化还原酶的cDNA在秋粘虫(Spodopterafrugiperda)(Sf-9)昆虫细胞内共表达时,根据HPLC分析,所述11α羟化酶成功催化从类固醇底物4-雄烯-3,17-二酮(AD)到11α-羟基-AD的转化。本发明还涉及与这些cDNA有关的核酸分子或衍生自这些cDNA的核酸分子,包括它们的互补物、同源物和片段,以及使用这些核酸分子产生例如多肽及其片段的方法。本发明还涉及产生识别赭曲霉11α羟化酶和氧化还原酶的抗体,以及使用这些抗体检测分别在未改变的宿主细胞和转化的宿主细胞内的这些天然和重组多肽的存在的方法。本发明还提供下面方法:在异源宿主细胞内分别表达或联合表达曲霉(Aspergillus)11α羟化酶基因和人或曲霉氧化还原酶,以便有利于类固醇底物到它们的11α羟基对应物的生物转化。