一种用于生产哌啶甲酸的重组质粒、基因工程菌株及方法

    公开(公告)号:CN107119065A

    公开(公告)日:2017-09-01

    申请号:CN201710287538.9

    申请日:2017-04-27

    申请人: 重庆大学

    发明人: 王丹 米乐 陈五九

    IPC分类号: C12N15/70 C12N1/21 C12P17/16

    摘要: 本发明公开了一种用于生产L‑哌啶甲酸的重组质粒和L‑哌啶甲酸异源合成代谢途径加强的高产基因工程菌,及哌啶甲酸的生产方法。本发明还公开了上述重组质粒以及基因工程菌的制备方法。高产基因工程菌构建的策略是:采用pTrc99a单质粒多基因串联表达,将L‑赖氨酸‑α‑氧化酶基因(LysoX),葡萄糖脱氢酶基因(gcd),Pip2C还原酶基因(DpkA),赖氨酸转运蛋白酶基因(lysQ)串联,优化各个基因前面的控制转录和翻译的调控元件,将构建的质粒pLMAIP‑05导入到敲除赖氨酸降解途径中的必须基因(cadA)的BL21(DE3)的感受态细胞中,得到一种L‑哌啶甲酸异源合成代谢途径加强的高产基因工程菌(MLPR08)。通过表达赖氨酸转运蛋白酶,提高了底物L‑赖氨酸转运至胞内的速率,缩短发酵时间,进一步促进了L‑哌啶甲酸的合成。

    复合酶制剂高效降解黄曲霉毒素B1的制备方法

    公开(公告)号:CN106636017A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201611063531.0

    申请日:2017-02-27

    IPC分类号: C12N9/02 A23L5/20

    摘要: 本发明通过将好食脉胞菌、雷斯青霉的发酵培养液进行离心、浓缩、硫酸铵沉淀、冷冻干燥的方法获得粗酶制剂,将两种粗酶制剂与真菌漆酶以特定的组分比混合,从而制成一种高效降解黄曲霉毒素B1的复合酶制剂。将好食脉胞菌粗酶制剂、雷斯青霉粗酶制剂与真菌漆酶混合,控制三者各自所占组分比在20%~60%,之和为1。所制成的复合酶制剂能够高效降解黄曲霉毒素B1,降解区间76%~89%。相同条件处理下,复合酶制剂的降解效率与三组分单独降解黄曲霉毒素B1效率相比提高25%以上。控制复合酶制剂与黄曲霉毒素B1在体系中之比为0.2g/L·ppm~0.4g/L·ppm时,相对于复合酶制剂中任一组分,复合酶制剂表现出显著的省料性。

    一种老黄酶基因及其应用
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106367426A

    公开(公告)日:2017-02-01

    申请号:CN201610867823.3

    申请日:2016-09-30

    发明人: 沙凤 孙科

    CPC分类号: C12N9/0004 C12P7/26

    摘要: 本发明公开了一种来源于氧化葡萄酸杆菌的老黄酶基因及其应用,基因核酸序列如SEQ ID NO:1所示,通过构建重组载体并在大肠杆菌中克隆表达,该基因编码的老黄酶氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。该老黄酶能高效催化茶香酮的碳碳双键手性还原生成左旋二酮。在添加葡萄糖脱氢酶用于辅酶原位再生的条件下,可以催化合成100 g/L左旋二酮。老黄酶对底物茶香酮的得率高(大于95%)、产物左旋二酮的光学活性高(e.e%为100%),且产量高,大大降低了生产成本。