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公开(公告)号：CN110680914A
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201910899652.6
申请日：2019-09-23
申请人： 洛阳职业技术学院 , 张贺伟 , 扬州优邦生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/235 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/20 , A61P31/14 , A61P31/16 , C07K14/075 , C12N15/866
摘要： 本发明提供了一种三联疫苗，所述三联灭活疫苗的抗原为灭活的鸡新城疫La Sota病毒株、灭活的H9亚型禽流感QF01株和灭活的I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白，还提供其制备方法：I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白经二乙烯亚胺灭活后，与灭活的鸡新城疫病毒浓缩液、灭活的禽流感病毒浓缩液混合乳化后得到三联灭活疫苗。本发明的三联灭活疫苗灭活的I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白含量高，免疫原性强，甲醛和内毒素含量低，对当前流行的I群8b型禽腺病毒具有较好的保护效果，安全性能好，免疫效果确实，可以抵抗新城疫病毒、禽流感病毒以及I群8b型禽腺病毒对临床鸡群的感染，持续期长，仅使用一次0.3mL疫苗的情况下，免疫持续期能达到五个月，至少给鸡群提供70%的保护率。
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公开(公告)号：CN110680914B
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN201910899652.6
申请日：2019-09-23
申请人： 洛阳职业技术学院 , 张贺伟 , 扬州优邦生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/235 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/20 , A61P31/14 , A61P31/16 , C07K14/075 , C12N15/866
摘要： 本发明提供了一种三联疫苗，所述三联灭活疫苗的抗原为灭活的鸡新城疫La Sota病毒株、灭活的H9亚型禽流感QF01株和灭活的I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白，还提供其制备方法：I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白经二乙烯亚胺灭活后，与灭活的鸡新城疫病毒浓缩液、灭活的禽流感病毒浓缩液混合乳化后得到三联灭活疫苗。本发明的三联灭活疫苗灭活的I群8b型禽腺病毒Hexon蛋白含量高，免疫原性强，甲醛和内毒素含量低，对当前流行的I群8b型禽腺病毒具有较好的保护效果，安全性能好，免疫效果确实，可以抵抗新城疫病毒、禽流感病毒以及I群8b型禽腺病毒对临床鸡群的感染，持续期长，仅使用一次0.3mL疫苗的情况下，免疫持续期能达到五个月，至少给鸡群提供70%的保护率。
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公开(公告)号：CN110079509A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910470033.5
申请日：2019-05-31
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株、灭活疫苗及其制备方法。所述的Ⅰ群11d型禽腺病毒株，命名为禽腺病毒RC18，该病毒株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17404。实验证明，本发明分离得到的I群11d型禽腺病毒RC18株毒价高，增殖能力强，免疫原性好，与流行株匹配，将其制备成灭活疫苗免疫实验鸡后能抵御临床流行的I群禽腺病毒(血清11d型)对鸡群的感染，免疫应答产生迅速，攻毒保护率高，并且未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应，安全性高，稳定性好。本发明的提出为鸡包涵体肝炎的防治提供了一种有效技术手段。
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公开(公告)号：CN110079509B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201910470033.5
申请日：2019-05-31
IPC分类号： C12N7/00 , A61K39/235 , A61P31/20 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种Ⅰ群11d型禽腺病毒株、灭活疫苗及其制备方法。所述的Ⅰ群11d型禽腺病毒株，命名为禽腺病毒RC18，该病毒株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.17404。实验证明，本发明分离得到的I群11d型禽腺病毒RC18株毒价高，增殖能力强，免疫原性好，与流行株匹配，将其制备成灭活疫苗免疫实验鸡后能抵御临床流行的I群禽腺病毒(血清11d型)对鸡群的感染，免疫应答产生迅速，攻毒保护率高，并且未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应，安全性高，稳定性好。本发明的提出为鸡包涵体肝炎的防治提供了一种有效技术手段。
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公开(公告)号：CN113549669A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110728594.8
申请日：2021-06-29
申请人： 洛阳职业技术学院
IPC分类号： C12Q1/02 , C12Q1/6886 , C12Q1/6806 , C12N9/10 , C07K19/00 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种鸡EZH2基因对肿瘤性疾病影响的研究方法，包括S1.纯化鸡EZH2原核蛋白，得到EZH2蛋白样品；S2.将纯化后的鸡EZH2原核表达蛋白与MSB1细胞共同培养，测定EZH2原核表达蛋白对MSB1细胞增殖的影响；S3.于不同时间提取细胞总RNA，检测MDV相关基因的表达水平并进行分析，测定EZH2原核表达蛋白对MDV相关基因的表达水平的影响；实验证明，鸡EZH2蛋白可影响MSB1细胞的增殖，且影响该细胞中MDV Meq和gB基因的表达，为进一步探究鸡EZH2在MDV感染致肿瘤中的作用机制研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113462709A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110728593.3
申请日：2021-06-29
申请人： 洛阳职业技术学院
摘要： 本发明公开了一种EZH2的原核表达载体及其构建方法，所述构建方法通过提取鸡脾脏、肝脏、法氏囊和胸腺总RNA，利用RT‑PCR技术，扩增鸡EZH2基因构建重组克隆载体PMD18‑T‑EZH2；然后对构建好的重组质粒PMD18‑T‑EZH2和原核表达载体PET‑32a分别进行双酶切，将所得目的片段进行连接，构建原核表达载体PET‑32a‑EZH2等过程，获得了EZH2的原核表达载体PET‑32a‑EZH2，PET‑32a‑EZH2的获得为下一步获得EZH2原核表达蛋白奠定基础，也可为探究EZH2基因在鸡肿瘤性疾病中的作用机制提供材料。
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公开(公告)号：CN113736826A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111145643.1
申请日：2021-09-28
摘要： 本发明属于NDV的疫苗开发和以重组NDV为基础的其他生物制品制剂技术领域，具体涉及一种广谱型的新城疫病毒全基因组扩增引物和扩增方法。本发明以新城疫病毒的总RNA为模板反转录合成cDNA，通过引物Part 1up/Part1down和Part 2up/Part 2down对cDNA进行RT‑PCR扩增得到Part 1和Part 2基因片段，经连接、转化，挑取阳性克隆得到新城疫病毒全基因组序列。本发明通过独特基因分段扩增方案，大大缩短建立重组NDV反向遗传系统的时间，该方案可用于所有新城疫病毒基因型，所需时间仅为目前已有方案的四分之一，并且保证病毒基因组的准确性和反向遗传系统构建的效率，在新城疫病毒疫苗的研发等方面具有极大的应用前景。
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公开(公告)号：CN113549669B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202110728594.8
申请日：2021-06-29
申请人： 洛阳职业技术学院
IPC分类号： C12Q1/02 , C12Q1/6886 , C12Q1/6806 , C12N9/10 , C07K19/00 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种鸡EZH2基因对肿瘤性疾病影响的研究方法，包括S1.纯化鸡EZH2原核蛋白，得到EZH2蛋白样品；S2.将纯化后的鸡EZH2原核表达蛋白与MSB1细胞共同培养，测定EZH2原核表达蛋白对MSB1细胞增殖的影响；S3.于不同时间提取细胞总RNA，检测MDV相关基因的表达水平并进行分析，测定EZH2原核表达蛋白对MDV相关基因的表达水平的影响；实验证明，鸡EZH2蛋白可影响MSB1细胞的增殖，且影响该细胞中MDV Meq和gB基因的表达，为进一步探究鸡EZH2在MDV感染致肿瘤中的作用机制研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113549603A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110730572.5
申请日：2021-06-29
申请人： 洛阳职业技术学院
摘要： 本发明公开了一种鸡EZH2蛋白的原核表达与纯化方法的研究方法，本方法在构建pET‑32a‑EZH2原核表达载体的基础上，在控制其他变量一致的条件下分别设计不同的诱导温度、诱导剂IPTG的浓度、诱导时间等条件对鸡EZH2原核蛋白的表达条件进行优化，由此得出EZH2蛋白原核表达的最优条件是温度29℃、诱导剂浓度1.0mMIPTG、诱导时间8h；并在最优条件下对原核表达蛋白进行纯化得到大量的目标蛋白，最终得到的蛋白大量分布在裂解上清液中，表明目的蛋白呈可溶性表达，本实验可为日后研究鸡EZH2蛋白在鸡肿瘤性疾病中的作用机制和蛋白功能提供材料。
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