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公开(公告)号：CN118085057A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410119332.5
申请日：2024-01-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种IPTG诱导猪源LC3B蛋白表达的方法。方法包括将pET28a‑LC3B原核表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测，选择带有目的条带的菌液，转接培养；在转接培养的菌液中加入IPTG，在IPTG终浓度0.1‑1.6mol/L条件下，16‑37℃诱导猪源LC3B蛋白表达8‑16小时；取制得的菌液，离心，弃上清；在沉淀中加入loading buffer混匀，100℃加热10min；离心，得到猪源LC3B蛋白的上清液。本发明在最佳诱导条件下能极大提高猪源LC3B在原核细胞中的表达量，为制备猪源LC3B单克隆抗体和相关研究奠定了良好的基础。
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