一种IPTG诱导猪源LC3B蛋白表达的方法

    公开(公告)号:CN118085057A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410119332.5

    申请日:2024-01-29

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种IPTG诱导猪源LC3B蛋白表达的方法。方法包括将pET28a‑LC3B原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经过选择性培养、单克隆液体培养、PCR检测,选择带有目的条带的菌液,转接培养;在转接培养的菌液中加入IPTG,在IPTG终浓度0.1‑1.6mol/L条件下,16‑37℃诱导猪源LC3B蛋白表达8‑16小时;取制得的菌液,离心,弃上清;在沉淀中加入loading buffer混匀,100℃加热10min;离心,得到猪源LC3B蛋白的上清液。本发明在最佳诱导条件下能极大提高猪源LC3B在原核细胞中的表达量,为制备猪源LC3B单克隆抗体和相关研究奠定了良好的基础。

    一种干扰素腺病毒纳米囊泡及其作为载药递送系统的应用

    公开(公告)号:CN118403176A

    公开(公告)日:2024-07-30

    申请号:CN202410271539.4

    申请日:2024-03-11

    Applicant: 浙江大学

    Inventor: 胡伯里 梁孝本

    Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,特别涉及一种干扰素腺病毒纳米囊泡及其作为载药递送系统的应用。一种干扰素腺病毒纳米囊泡,将如SEQ ID No.1所示的人干扰素IFN‑α5核苷酸序列插入腺病毒基因组;由得到的腺病毒感染间充质干细胞,通过滤膜挤压后形成纳米囊泡,得到所述干扰素腺病毒纳米囊泡。相比普通纳米囊泡,本发明所述的干扰素腺病毒纳米囊泡额外添加的基因递送系统,对于疾病具有更好的特异性治疗效果;相比于单纯腺病毒递送系统,纳米囊泡载药递送能够减轻腺病毒载体所生成的负面影响,同时额外递送抗炎及免疫调节信号分子。

    一种重组腺病毒及其在制备抗PEDV药物方面的应用

    公开(公告)号:CN118526576A

    公开(公告)日:2024-08-23

    申请号:CN202410459669.0

    申请日:2024-04-17

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域,涉及干扰素亚型抗病毒应用,涉及一种重组腺病毒及其在制备抗PEDV药物方面的应用。一种重组腺病毒,该重组腺病毒包括猪干扰素IFN‑α6,IFN‑α14或IFN‑ω5中的一种和穿透肽的基因序列,所述穿透肽的氨基酸序列为PPRRRQRRKKRG,如SEQ ID NO.4所示。本发明通过体外过表达的方法筛选高效抗病毒干扰素亚型基因,将干扰素通过原核表达结构优化及腺病毒载体包装的方法进行干扰素递送。结合细胞穿透肽的重组腺病毒能够更高效发挥抗病毒效果,腺病毒载体基因递送系统高效地使靶细胞自主表达干扰素,简化干扰素递送流程。

    用于药物递送的含修饰蛋白的双层膜囊泡及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN116271102A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310030058.X

    申请日:2023-01-09

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供了用于药物递送的含修饰蛋白的双层膜囊泡及其制备方法和应用,所述含修饰蛋白的双层膜囊泡是将修饰蛋白编码基因与基础载体连接后转入宿主细胞,诱导产生含修饰蛋白的双层膜囊泡;所述修饰蛋白包括标签蛋白TAG、适配体结合蛋白ABP或双层膜囊泡结构蛋白ASP中的一种或多种的混合。本发明采用抗原嵌合方式对双层膜囊泡进行修饰,双层膜囊泡可以装载多肽药物,还可以通过结合的适配体把多肽药物、表达蛋白的核酸、敲低(miRNA,siRNA)、敲除(sgRNA)核酸、或其他一切形式的核酸装载入该结构,也可以通过药物受体捕捉小分子药物和纳米材料装载入双层膜囊泡。双层膜囊泡具有高效的药物富集能力,并且具有低免疫源性,可以通过其生物囊膜结构快速的与靶细胞融合,并把药物送至靶细胞。

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