识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及其制备方法

    公开(公告)号:CN101157727A

    公开(公告)日:2008-04-09

    申请号:CN200710071321.0

    申请日:2007-09-14

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明的识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及制备方法属于生物技术领域,涉及抗体工程技术。用辛酸-硫酸铵盐析法和Superdex 200凝胶层析法从斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清中提取IgY蛋白;用纯化的IgY蛋白联合免疫BALB/c小鼠,用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,以HAT培养基选择性培养,用15种水禽IgY蛋白进行间接ELISA筛选和有限稀释法克隆化,获得分泌抗15种水禽共同IgY抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中2A12、5D4、3A8和5H9识别水鸟和水禽IgY轻链,7D3、6A2和6D11识别水鸟和水禽IgY重链,其腹水的ELISA效价为0.5-1.0×106,Ig亚型重链为IgG1,轻链为κ。本发明为水鸟和水禽流行病尤其是禽流感抗体检测提供诊断试剂。

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