抗传染性法氏囊病病毒VP4蛋白单克隆抗体

    公开(公告)号:CN101121748B

    公开(公告)日:2010-07-21

    申请号:CN200710070131.7

    申请日:2007-07-20

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白单克隆抗体属于生物技术领域,涉及基因工程。将IBDV VP4基因克隆于原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达;分离包涵体,用8M尿素溶解,经镍螯合亲和层析纯化获得VP4重组蛋白。用VP4重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,以HAT培养基选择性培养后,以VP4重组蛋白和IBDV感染细胞进行双重ELISA筛选和有限稀释法克隆化,获得分泌抗IBDV VP4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中4C3、6A4和6H8腹水的ELISA效价分别为:6.4×105、2.6×106和5.2×106,均能特异识别IBDV感染细胞的病毒蛋白,其Ig亚型重链为IgG1,轻链为κ。

    抗传染性法氏囊病病毒VP4蛋白单克隆抗体

    公开(公告)号:CN101121748A

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200710070131.7

    申请日:2007-07-20

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白单克隆抗体属于生物技术领域,涉及基因工程。将IBDV VP4基因克隆于原核表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达;分离包涵体,用8M尿素溶解,经镍螯合亲和层析纯化获得VP4重组蛋白。用VP4重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,以HAT培养基选择性培养后,以VP4重组蛋白和IBDV感染细胞进行双重ELISA筛选和有限稀释法克隆化,获得分泌抗IBDV VP4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中4C3、6A4和6H8腹水的ELISA效价分别为:6.4×105、2.6×106和5.2×106,均能特异识别IBDV感染细胞的病毒蛋白,其Ig亚型重链为IgG1,轻链为κ。

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