公开(公告)号：CN112575088B

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202011596715.X

申请日：2020-12-29

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  刘鹏渊 ,  吕卫国 ,  周兰韵

IPC: C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种血浆外泌体miRNA生物标记物及其应用，所述miRNA生物标记物包括miR‑15a‑5p，miR‑106b‑5p，和miR‑107中的一种或多种，具有在制备子宫内膜癌筛查诊断的试剂盒中的应用。在202个测试样本中，通过3个外泌体miRNAs的表达量就能区分子宫内膜癌患者和健康志愿者(AUC＝0.873)，还能和肿瘤标志物CEA以及CA125进行联合(AUC＝0.904)，达到更高的灵敏度和特异性。同时，这三个miRNAs在早期诊断(I期内膜癌患者的诊断)中也有作用，在ROC曲线中它们的联合AUC值为0.869，和肿瘤标志物联合后可进一步提升至0.915。本发明制备的试剂盒由特异性扩增引物以及通用PCR扩增试剂组成，具有较高的临床价值，可以有效用于子宫内膜癌的筛查诊断，包括早期筛查。

公开(公告)号：CN109913547A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910157340.8

申请日：2019-03-01

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  刘鹏渊 ,  吕卫国 ,  郑梦月

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种血浆外泌体miRNA生物标志物及其在用于宫颈癌早期诊断的微量数字PCR试剂盒中的应用，所述分子标记的RNA序列如SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:8所示。以本发明标记物为基础进行检测，灵敏度高，特异性好，AUC可高达0.992，诊断效果良好。在测试数据中，根据其中的2个miRNAs的表达量，能有效区分宫颈上皮内瘤变1级以下和宫颈上皮内瘤变2级以上的患者样本。本发明公开的新型的血浆外泌体miRNA分子标记物具有良好的诊断指标的特性，所开发的用于检测这8个miRNA的诊断试剂盒及检测方法，所述试剂盒由特异性扩增引物以及通用PCR扩增试剂组成，可以有效用于宫颈癌筛查诊断，具有较高的临床使用和推广价值。

公开(公告)号：CN109852686A

公开(公告)日：2019-06-07

申请号：CN201910142875.8

申请日：2019-02-26

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  郑梦月 ,  刘鹏渊 ,  吕卫国

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6886 ,  C12N15/113 ,  G16B25/10 ,  G16B25/20

Abstract: 本发明公开了一种外泌体miRNA标准化的多内参联合定量的方法及其用途，具体包括以下步骤：(1)高通量miRNA测序数据的标准化处理；(2)利用变异系数和标准差筛选内参miRNAs；(3)数字PCR的测序引物设计；(4)miRNA的数字PCR检测；(5)多内参联合标准的R_score值计算。通过对大量取自健康的体检样本和不同程度疾病患者的样本进行研究，发现miR-128-3p,miR-129-5p,miR-320a和Let-7i-5p或其组合能够作为血浆外泌体microRNA标准化的内参，具有极高的稳定性和准确度。本发明基于数字PCR方法，为生物体内外泌体miRNA的研究提供了一种有效且便捷的定量标准化检测，弥补目前外泌体中没有标准内参U6 snRNA的缺陷，对于全面深入外泌体microRNA的生物标志物筛选具有的重要意义。

公开(公告)号：CN112575088A

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN202011596715.X

申请日：2020-12-29

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  刘鹏渊 ,  吕卫国 ,  周兰韵

IPC: C12Q1/6886

Abstract: 本发明公开了一种血浆外泌体miRNA生物标记物及其应用，所述miRNA生物标记物包括miR‑15a‑5p，miR‑106b‑5p，和miR‑107中的一种或多种，具有在制备子宫内膜癌筛查诊断的试剂盒中的应用。在202个测试样本中，通过3个外泌体miRNAs的表达量就能区分子宫内膜癌患者和健康志愿者(AUC＝0.873)，还能和肿瘤标志物CEA以及CA125进行联合(AUC＝0.904)，达到更高的灵敏度和特异性。同时，这三个miRNAs在早期诊断(I期内膜癌患者的诊断)中也有作用，在ROC曲线中它们的联合AUC值为0.869，和肿瘤标志物联合后可进一步提升至0.915。本发明制备的试剂盒由特异性扩增引物以及通用PCR扩增试剂组成，具有较高的临床价值，可以有效用于子宫内膜癌的筛查诊断，包括早期筛查。

公开(公告)号：CN112941180A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110213621.8

申请日：2021-02-25

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  孙喜伟 ,  周莉媛 ,  刘鹏渊 ,  陈恩国

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6809 ,  G16B25/20 ,  G16B20/30 ,  G16B5/00 ,  G16B40/00

Abstract: 本发明公开了一组肺癌的DNA甲基化分子标志物及其在制备用于肺癌早期诊断试剂盒中的应用。所述标志物是20个基因CDO1，SOX17，TCF21，TRIM58，ITGA9，CYYR1，CLEC14A，SLIT2，ZNF677，IRX2，ACVRL1，OSR1，ADCY8，GALNT13，HSPB6，IRX1，ITGA5，PCDH17，TBX5和TCTEX1D1序列的甲基化。其中8个是在肺癌中新发现的甲基化指纹基因，包括ADCY8，GALNT13，HSPB6，IRX1，ITGA5，PCDH17，TBX5和TCTEX1D1。以本发明标志物为基础，构建肺癌诊断的数学模型；该模型灵敏度高，特异性好，AUC可高达0.998，诊断效果良好。本发明还公开了检测所述DNA甲基化标志物的方法。本发明公开的DNA甲基化分子标志物具有良好的诊断指标特性，可以有效用于肺癌诊断，具有较高的临床使用和推广价值。

公开(公告)号：CN108796048A

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201810663764.7

申请日：2018-06-25

Applicant: 浙江大学医学院附属妇产科医院

Inventor： 陆燕 ,  余梦倩 ,  刘鹏渊 ,  周莉媛

IPC: C12Q1/6851

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2525/191

Abstract: 本发明公开了一种精确分辨tRNA来源片段末端单个核苷酸差异的检测方法，包括以下步骤：(1)特异性接头序列、特异性逆转录引物与检测探针和引物序列的设计；(2)接头连接：在RNA中加入步骤(1)中设计的特异性接头序列，经过变性、退火、连接三步形成特异性末端环状发夹结构；(3)步骤(2)所述接头RNA与步骤(1)所述特异性逆转录引物混合进行逆转录；(4)TaqMan qPCR检测。本发明基于TaqMan qPCR方法，为生物体内tRF的研究提供了一种有效且便捷的可精确分辨不同tRF变体的方法，分辨率可精确至单个核苷酸差异，这对于全面深入研究tRF的生物学功能和作用机制具有有重要意义。