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公开(公告)号:CN118374636A
公开(公告)日:2024-07-23
申请号:CN202410833331.7
申请日:2024-06-26
申请人: 浙江大学海南研究院 , 无锡哈勃生物种业技术研究院有限公司 , 三明市农业科学研究院
IPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
摘要: 本发明提供一种鉴定显性雄性不育回交后代中不育株的方法,以SEQ ID NO.1所示的序列为靶基因序列,设计特异性引物序列,以待测水稻DNA为模板进行PCR扩增,检测,若扩增出500‑520bp产物,则代表待测样本为雄性不育植株。该方法可在水稻幼苗期区分出显性雄性不育杂交后代群体中的不育株。该鉴定方法操作简便,检测时间短,无需特殊的器材或试剂,易于批量检测,有利于促进显性雄性不育系在育种中的规模化使用。
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公开(公告)号:CN116751761A
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202310762518.8
申请日:2023-06-27
申请人: 无锡哈勃生物种业技术研究院有限公司 , 浙江大学海南研究院
摘要: 本发明公开了籼稻ALS突变型蛋白及其编码基因与应用,涉及生物技术、作物遗传育种领域。本发明采取多重复合诱变以及除草剂筛选育种,结合了辐射诱变和EMS诱变,同时进行了除草剂多浓度梯度浸种和叶片喷施的筛选,获得了具有除草剂抗性的籼稻ALS突变体植株,经过测序验证,确认了突变株植株的位点变异、籼稻ALS突变蛋白和编码基因,获得了籼稻具有ALS抑制类除草剂抗性的新位点,提供了一套快速筛选、鉴定后代抗除草剂植株的新方法,并提供了一种有效防治籼稻草害的方法。全球80%的稻米生产基于籼稻,抗除草剂籼稻的抗草害种植具有极大的应用价值。
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公开(公告)号:CN118620950A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202411103031.X
申请日:2024-08-13
申请人: 浙江大学海南研究院
IPC分类号: C12N15/82 , C12N15/113 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/46
摘要: 本发明公开了基于OsLEC1基因在水稻愈伤组织分化应用的制作方法,包括:选择gRNA靶位点;克隆含有gRNA的串联片段;连接各gRNA片段;对连接产物进行PCR扩增;纯化产物和目标载体的酶切;转化;农杆菌介导的水稻转基因;转基因植株的筛选与鉴定。选择gRNA靶位点具体包括如下步骤:根据CRISPR‑Cas9技术的靶位点设计原则;在靠近OsLEC1基因5’端的基因序列上设计2个gRNA靶位点。克隆含有gRNA的串联片段具体包括如下步骤:以质粒pGTR为模板。在本发明中,愈伤组织的分化直接影响了转基因的出苗效率,OsLEC1的敲除可以促进水稻愈伤组织的分化,提示它可能作为一个提高水稻乃至禾本科作物转化效率的一个重要靶标基因,可以以它为出发点来构建各种分子工具提高转化效率。
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公开(公告)号:CN118515737A
公开(公告)日:2024-08-20
申请号:CN202410985272.5
申请日:2024-07-23
申请人: 浙江大学海南研究院
IPC分类号: C07K14/415 , C12N15/70
摘要: 本发明公开了一种基于水稻生长素受体基因的蛋白质原核表达系统创建方法,包括:取适量水稻叶片按水稻RNA快速提取试剂盒说明书提取出水稻的RNA,再用逆转录反应试剂合成cDNA;根据已有数据库公布的基因序列,设计OsAFB4基因(LOC_Os02g52230)的特异引物;本发明以水稻日本晴的cDNA为模板,克隆OsAFB4的CDS,构建不同的原核表达载体并实现在大肠杆菌中的表达。结果显示,pET‑32a‑OsAFB4为最佳融合表达载体,其在大肠杆菌高效表达及纯化的最佳诱导条件为:200μM IPTG诱导,23℃下在LB培养基中培养12小时。该体系有助于进一步了解该蛋白的特性,为后续精准定位其结合生长素类除草剂的关键氨基酸位点及研发抗生长素类除草剂作物新品种奠定了实验基础。
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