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公开(公告)号：CN112725295A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202010464283.0
申请日：2020-05-27
申请人： 浙江工业大学 , 杭州睿道医药科技有限公司 , 章志豪
摘要： 本发明属于有机物分离纯化领域，具体涉及一种重组型超氧化物歧化酶(简称重组型SOD)及编码所述重组型SOD的基因和相关的表达载体、转基因细胞系和宿主菌，以及所述重组型SOD的制备方法，所述重组型SOD的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.4所示，所述编码重组型SOD的基因的基因序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。本发明所述重组型SOD经试验检验，具有极好的热稳定性、极好的酸碱耐受性和较好的常用防腐剂耐受性，可以广泛应用于医药、化妆品和食品领域。
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公开(公告)号：CN118325865A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410419260.6
申请日：2024-04-09
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N9/18 , C12N15/55 , C12N1/21 , C12N15/70 , A01N63/50 , A01P1/00 , A01G7/06 , A01G13/00 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种新的高稳定性N‑酰基高丝氨酸内酯酶AhlP及其应用，该酶具有良好的活性和高度的稳定性，经过高温处理后活性能够被激活，其中60℃热处理6h后活性激活至原始活性的1.4倍，70℃热处理5h后活性被激活至原始活性的1.4倍，室温放置30d后活性能保持80％以上；在pH 4.0～11.0的条件下处理30min后，活性能保持80％以上；在5％乙腈的磷酸缓冲液中孵育30min，活性能保持100％；在含5％乙醇、异戊醇的磷酸缓冲液中孵育30min，活性能保持在60％以上。这意味着该酶在复杂的自然环境中能够保持良好的活性，有望用于防治由胡萝卜软腐欧文氏菌引起的植物软腐病。
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公开(公告)号：CN116334067A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202310355626.3
申请日：2023-04-06
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种能有效提高葡萄糖脱氢酶稳定性的固定化方法，该方法通过将葡萄糖脱氢酶溶液、磷酸缓冲溶液和金属盐溶液一起混合静置一段时间后，离心收集沉淀，即可得到葡萄糖脱氢酶固定化酶，相较于游离的葡萄糖脱氢酶，本发明得到的固定化酶在高温反应条件下其催化活性显著提高，而且具有更好的稳定性，具有较高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN113278601B
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202110531780.2
申请日：2021-05-17
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种腺苷酰化蛋白A6突变体以及其编码基因，以及其作为腺苷酰化结构域关键酶在催化合成多粘菌素中的应用。所述腺苷酰化蛋白A6突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的腺苷酰化蛋白A6第516位氨基酸经点突变而得。本发明利用基因工程和酶工程手段，对A域的活性位点进行研究，通过构建突变体确定了与A域底物特异性相关的关键氨基酸残基(A6第516位残基)，本发明获得的突变体G516A与腺苷酰化蛋白A6相比，底物特异性发生改变，对L‑Ala的活性大幅提高，出现了对L‑Arg的活性，证明对该位点的氨基酸残基进行改造能够改变腺苷酰化蛋白的底物识别，为多粘菌素家族化合物结构的扩展提供了新的途径。
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公开(公告)号：CN114634544A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210329780.9
申请日：2022-03-31
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C07J13/00
摘要： 本发明公开了一种夫西地酸的规模化分离纯化方法，具体实施方式为将夫西地酸发酵液用草酸调节pH，过滤分离，得到湿菌渣后烘干；干菌渣粉碎后用有机溶剂搅拌提取，过滤得到提取液；提取液浓缩至干，加入溶剂溶解搅拌；加入乙酸乙酯溶剂进行萃取；萃取液加入活性炭脱色、无水硫酸钠干燥后过滤；用碱溶液调节pH收集水相，分多次用草酸调节pH收集酯相，再用草酸调节pH收集酯相，合并酯相后用无水硫酸钠干燥，酯相真空浓缩至粘稠；粘液加热后加入溶剂溶解过滤，收集滤液；真空浓缩得夫西地酸。本发明操作简单，有机溶剂用量少，避免了因使用大孔树脂、硅胶或有机溶剂结晶而产生大量废水和有机溶剂，且收率和纯度高，更适合规模化生产，成本低，效益高。
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公开(公告)号：CN109988756B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201910200067.2
申请日：2019-03-15
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N9/96
摘要： 本发明公开了一种N‑酰基高丝氨酸内酯酶(AHL‑内酯酶)‑无机杂化纳米催化剂及其制备方法，该纳米催化剂是将有机组分——AHL‑内酯酶和无机组分——不溶性磷酸盐(如锌、镍、锰和钴等)组成，其制备方法为将AHL‑内酯酶和可溶性金属盐分别加入到磷酸盐缓冲液中，所得的混合液经静置、除去上层清液、真空干燥，即可得到粒径小、结构稳定的AHL‑内酯酶‑无机杂化纳米催化剂。本发明制备方法简单，所得的AHL‑内酯酶‑无机杂化纳米催化剂的活性较之游离酶得到显著提高，且热稳定性好，小粒径的复合物比表面积大，增加了其在反应中与底物的接触面积。且该酶底物谱广，能有效降解多种信号分子，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN112280812A
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN202011068674.7
申请日：2020-09-30
申请人： 浙江工业大学 , 浙江绿创生物科技股份有限公司 , 生英涛
摘要： 本发明公开了一种提高金黄霉素A的发酵产量和金黄霉素A与B之间比例的方法，步骤1：发酵罐移种后，以一定通气量和罐压，28℃搅拌培养；步骤2：发酵开始后，每隔一定时间取样检测发酵液中的残糖浓度，当达到预设值后开始连续流加糖溶液；步骤3：每隔一定时间取样检测发酵液中黄金霉素A的含量和发酵液离心后上清液中黄金霉素A的含量；步骤4：判断当前时段的发酵液中黄金霉素A的含量是否增加缓慢且当前时段的发酵液离心后上清液中黄金霉素A的含量快速增加，若是，放罐。本发明的方法操作简便，金黄霉素A的发酵产量可以达到3.5克/升，金黄霉素A与金黄霉素B的比例可以达到10∶1，极大的方便了后续提取过程中金黄霉素A的分离纯化。
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公开(公告)号：CN110144303B
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN201910221852.6
申请日：2019-03-22
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/20 , C07D403/06 , C12P17/16 , A61P11/00 , A61P19/02 , A61P1/18 , A61P7/02 , A61P9/12 , A61P35/00 , A61P31/18 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了一种哌嗪二酮类化合物、菌株及制备与应用，将微杆放线菌(Actinomycetes microbacterium)40DY180经发酵培养获得的发酵液离心，取上清液进行乙酸乙酯萃取，有机相经LH‑20凝胶柱、ODS反向柱、半制备液相分离纯化，获得所述哌嗪二酮类化合物；本发明的微杆放线菌40DY180，能够制备一种新的哌嗪二酮类化合物，该化合物具有抑制酪氨酸酶活性(250μM下的抑制率为50.69％)，可用于美白产品。
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公开(公告)号：CN110372769B
公开(公告)日：2020-10-02
申请号：CN201811653139.0
申请日：2018-12-29
申请人： 浙江工业大学 , 浙江绿创生物科技有限公司 , 湖南新合新生物医药有限公司
摘要： 本发明涉及一种甾体发酵后提取新方法，其包括以下工艺步骤：发酵液升温灭活；初始膜水通量的测定，发酵液进行膜过滤收集截留液，再进行膜的清洗，洗至初始膜水通量；所得截留液继续用甲醇萃取，分层得到甾体产品甲醇萃取液，再继续浓缩至粘稠状加水分散过滤得粗品；粗品再用第一种溶剂升温打浆，降温过滤得一精，一精再用第二种溶剂溶解、脱色、重结晶即得成品。本发明设计合理，工艺简单，可操作性强，工作环境毒害性小，不仅避免了传统工艺全萃法的的乳化难分离现象，而且提供了一种新型的分离方法，避免了有毒萃取有机溶剂的使用，解决了废水处理问题。该法成本低，收率高，最终产品符合市场品质要求。
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公开(公告)号：CN110055290A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201810907482.7
申请日：2018-08-10
申请人： 浙江工业大学 , 浙江绿创生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种固定化酶催化生产左旋多巴的方法，其特征在于：(1)挑单菌落接种到含LB培养基的试管中，加氨苄青霉素(100mg/L)30-37℃，220rpm，培养12-16h，得到一级种子；(2)将所述一级种子接种到含发酵培养基的摇瓶中培养10-12h；(3)离心收菌，得到菌体，压榨破胞，加壳聚糖溶液絮凝，高速离心，获得上清酶液，加入固定化载体EP200，25℃搅拌混合12-24h，三足式离心收集固定化酶，用50mM的磷酸钾缓冲液(pH8.0)，多次洗涤，过滤，获得固定化酶；(4)固定化酶20g，加入底物溶液，搅匀，25℃，密封震荡反应；所述底物溶液包括14-16g/L的丙酮酸钠、10-12g/L的邻苯二酚、40-45g/L的氯化铵、2-5g/L的亚硫酸钠、1-3g/L的EDTA，调pH7.5-8.5。
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