公开(公告)号：CN110540975A

公开(公告)日：2019-12-06

申请号：CN201910800438.0

申请日：2019-08-28

Applicant: 浙江工业大学 ,  浙江永太科技股份有限公司 ,  浙江永太药业有限公司

Inventor： 柳志强 ,  程峰 ,  陈秀玲 ,  张晓健 ,  郑裕国 ,  何人宝 ,  金逸中 ,  林娇华

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种ω-转氨酶突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用，该ω-转氨酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第56位或第134位进行单突变获得；第56位的苯丙氨酸替换成缬氨酸、组氨酸或酪氨酸；第134位的苏氨酸替换成甘氨酸。本发明通过分子对接和同源建模等方式获得一些可能影响其催化活性的位点，对其进行了定点突变，最终得到的ω-转氨酶突变体不仅具有较高的酶活，酶活均高于300U/g，至少是野生型的2.7倍，而且能够高效催化西他列汀中间体前体酮1-哌啶-4-(2,4,5-三氟苯基)-1,3-二丁酮合成西他列汀中间体(R)-3-氨基-1-哌啶-4-(2,4,5-三氟苯基)-1-丁酮，转化率高达85％。

公开(公告)号：CN110540975B

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN201910800438.0

申请日：2019-08-28

Applicant: 浙江工业大学 ,  浙江永太科技股份有限公司 ,  浙江永太药业有限公司

Inventor： 柳志强 ,  程峰 ,  陈秀玲 ,  张晓健 ,  郑裕国 ,  何人宝 ,  金逸中 ,  林娇华

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在制备西他列汀中间体中的应用，该ω‑转氨酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第56位或第134位进行单突变获得；第56位的苯丙氨酸替换成缬氨酸、组氨酸或酪氨酸；第134位的苏氨酸替换成甘氨酸。本发明通过分子对接和同源建模等方式获得一些可能影响其催化活性的位点，对其进行了定点突变，最终得到的ω‑转氨酶突变体不仅具有较高的酶活，酶活均高于300U/g，至少是野生型的2.7倍，而且能够高效催化西他列汀中间体前体酮1‑哌啶‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1,3‑二丁酮合成西他列汀中间体(R)‑3‑氨基‑1‑哌啶‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑1‑丁酮，转化率高达85％。