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公开(公告)号:CN112175993B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN202010909945.0
申请日:2020-09-02
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司 , 中国科学院生物物理研究所
摘要: 本发明提供一种稳定高表达蛋白的单拷贝细胞株的构建方法及其应用,所述方法基于293T细胞的可以快速精确插入且能稳定高水平表达目的基因。所述方法通过随机插入结合高通量筛选策略建立了一个稳定、高效表达且可替换目的基因的293T细胞株。基于此细胞株,我们成功表达了属于GPCR家族之一的腺苷A2A受体蛋白(ADORA2A)。利用这种方法可以进行反复的盒式重组替换,可将欲被表达或优化的抗体或别的蛋白质基因快速准确地插入到该细胞基因盒中,且不会破坏基因框的完整性。
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公开(公告)号:CN111205361A
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN201811400000.5
申请日:2018-11-22
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司 , 中国科学院生物物理研究所
IPC分类号: C07K14/54 , C07K19/00 , C12N15/24 , C12N15/62 , A61K38/20 , A61P37/02 , A61P37/04 , A61P35/00
摘要: 本发明涉及一种一种白介素21蛋白(IL21)突变体及其应用,所述的突变体为,在野生型IL21的第16位ILE、第70位SER,都突变为CYS,并在两个突变的CYS之间形成二硫键。所述的野生型IL21蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还涉及包含所述的IL21蛋白突变体的融合蛋白,以及所述的IL21蛋白突变体或融合蛋白在制备药物中的应用,优选的,所述的药物是调节或激活免疫的药物或抗肿瘤药物。本发明还涉及所述的IL21蛋白突变体或融合蛋白在制备促进B细胞分化增殖,促进T细胞分化增殖,促进NK细胞分化增殖的制剂中的应用。
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公开(公告)号:CN117987463A
公开(公告)日:2024-05-07
申请号:CN202211372153.X
申请日:2022-11-03
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
摘要: 本公开涉及了用于蛋白突变体筛选的系统及其应用。本公开提供了腺嘌呤脱氨酶(ADA)或其脱氨酶结构域,或其编码核酸序列或含其编码核酸序列的表达载体在构建蛋白突变体文库中的应用。本公开还提供了使用ADA和AID用于构建蛋白突变体文库的方法,以及筛选蛋白突变体的方法。
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公开(公告)号:CN115109159A
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN202210725692.0
申请日:2022-06-24
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
摘要: 本发明提供了一种突变的CD19胞外结构域,所述突变的CD19胞外结构域与亲本CD19胞外结构域的氨基酸序列相比,在对应于SEQ ID No.1所示氨基酸序列的以下任一或任意几个氨基酸位点处存在突变:第82位、第83位、第29位、第184位或第234位;所述第82位氨基酸突变为V,所述第83位氨基酸突变为L,所述第29位氨基酸突变为G,所述第184位氨基酸突变为P,所述第234位氨基酸突变为W。
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公开(公告)号:CN108997492B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN201810795499.8
申请日:2018-07-19
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
IPC分类号: C07K14/705 , C07K19/00 , C12N15/62
摘要: 本发明涉及一组一种高亲和力的PD1胞外区突变体多肽及相关的融合蛋白,所述的突变体在如Seq ID No.23所示的野生型PD1分子胞外区多肽序列的基础上,包含至少一个的如下突变位点:E13G、A17V、A17D、S29G、L32M、N33S、L46M、L46V、R52G、S54T、Q66H、S76P、W83S、L89P、A99V、K102E、I110V、E117G。所述的融合蛋白为所述多肽与人IgG1的Fc区融合而成的融合蛋白。
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公开(公告)号:CN110791470A
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201910873232.0
申请日:2019-09-17
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
摘要: 本申请提供了一种对目标蛋白的稳定性和亲和力进行优化的方法,所述方法包括如下步骤:(1)构建目标蛋白表达基因;(2)将所述目标蛋白表达基因在CHO-puro-TR细胞系中表达;(3)将表达目标蛋白表达基因的CHO-puro-TR细胞系在第一温度下培养诱导体细胞高频突变以获得含有目标蛋白突变库的细胞;(4)将步骤(3)获得的含有目标蛋白突变库的细胞在第二温度下培养一段时间;(5)对步骤(4)得到的细胞在目标蛋白的配体存在的条件下,在第三温度下孵育一段时间,所述目标蛋白的配体可以被标记物标记;(6)对步骤(5)培养得到的细胞进行流式分选,筛选含有稳定性和亲和力提高的目标蛋白的细胞。
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公开(公告)号:CN117607447A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202311195384.2
申请日:2023-09-17
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
摘要: 本公开涉及一种筛选抗体的方法及其应用。所述方法包括以下三个步骤:提供源自第一抗体的抗体突变体文库;添加抗原和经标记的第二抗体,以标记所述抗体突变体文库;和,筛选与所述抗原结合亲和力提高的抗体突变体。通过本公开的方法,获得了与抗原结合水平提高的来源于第一抗体的突变体。获得的第一抗体的突变体能够与所述第二抗体进行改善的夹心双抗体检测。
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公开(公告)号:CN111205361B
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN201811400000.5
申请日:2018-11-22
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司
IPC分类号: C07K14/54 , C07K19/00 , C12N15/24 , C12N15/62 , A61K38/20 , A61P37/02 , A61P37/04 , A61P35/00
摘要: 本发明涉及一种一种白介素21蛋白(IL21)突变体及其应用,所述的突变体为,在野生型IL21的第16位ILE、第70位SER,都突变为CYS,并在两个突变的CYS之间形成二硫键。所述的野生型IL21蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还涉及包含所述的IL21蛋白突变体的融合蛋白,以及所述的IL21蛋白突变体或融合蛋白在制备药物中的应用,优选的,所述的药物是调节或激活免疫的药物或抗肿瘤药物。本发明还涉及所述的IL21蛋白突变体或融合蛋白在制备促进B细胞分化增殖,促进T细胞分化增殖,促进NK细胞分化增殖的制剂中的应用。
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公开(公告)号:CN113846066A
公开(公告)日:2021-12-28
申请号:CN202111082050.5
申请日:2021-09-15
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司 , 中国科学院生物物理研究所
IPC分类号: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/68
摘要: 本发明提供了能够分泌ST2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所述杂交瘤细胞株分泌的ST2的抗体可以高效的用于双抗体夹心法对ST2进行检测,本发明的杂交瘤细胞株分泌的单抗,可用于制备双抗夹心ELISA检测ST2所需的配对单克隆抗体,在优选的实施方式中,用于血液中ST2蛋白的双抗夹心ELISA检测。
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公开(公告)号:CN112175993A
公开(公告)日:2021-01-05
申请号:CN202010909945.0
申请日:2020-09-02
申请人: 海珂分子(北京)科技有限责任公司 , 中国科学院生物物理研究所
摘要: 本发明提供一种稳定高表达蛋白的单拷贝细胞株的构建方法及其应用,所述方法基于293T细胞的可以快速精确插入且能稳定高水平表达目的基因。所述方法通过随机插入结合高通量筛选策略建立了一个稳定、高效表达且可替换目的基因的293T细胞株。基于此细胞株,我们成功表达了属于GPCR家族之一的腺苷A2A受体蛋白(ADORA2A)。利用这种方法可以进行反复的盒式重组替换,可将欲被表达或优化的抗体或别的蛋白质基因快速准确地插入到该细胞基因盒中,且不会破坏基因框的完整性。
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