公开(公告)号：CN110079543A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910367801.4

申请日：2019-05-05

申请人： 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

发明人： 黄超华 ,  曹琛福 ,  花群义 ,  史卫军 ,  杨俊兴 ,  林彦星 ,  阮周曦 ,  曾少灵 ,  王潇

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/66 ,  C07K14/005 ,  C12R1/19

摘要： 本申请公开了一种同时表达蓝舌病病毒vp3和vp7蛋白的大肠杆菌以及蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法。本申请将蓝舌病病毒vp3基因和vp7基因插入到双表达载体pETDuet-1，构建原核双表达质粒pETDuet-VP3-VP7，并转化表达型大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含原核双表达质粒pETDuet-VP3-VP7的表达菌，自诱导表达后，通过超声破碎和蔗糖梯度离心获得蓝舌病病毒核心样颗粒。本申请实现了以原核表达方式高量高纯度表达具有良好免疫活性的蓝舌病病毒核心样颗粒。

公开(公告)号：CN109897092A

公开(公告)日：2019-06-18

申请号：CN201910262561.1

申请日：2019-04-02

申请人： 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

发明人： 黄超华 ,  曹琛福 ,  史卫军 ,  花群义 ,  杨俊兴 ,  阮周曦 ,  林彦星 ,  曾少灵 ,  王潇

IPC分类号： C07K14/14 ,  C12N15/46 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

摘要： 本申请涉及一种序列优化的蓝舌病病毒非结构蛋白NS3基因、相应表达载体、宿主细胞及其制备方法。本申请对NS3基因进行优化，并构建冷休克原核重组表达载体pCold-NS3，转化表达型大肠杆菌BL21(DE3)，经诱导表达获得可溶性表达的蓝舌病病毒非结构蛋白NS3。本申请通过优化NS3基因，采用冷休克表达载体，同时采用自诱导表达培养基使NS3基因在低温条件长时间表达，实现蓝舌病病毒非结构蛋白NS3的大量可溶表达。