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公开(公告)号：CN110079543A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910367801.4
申请日：2019-05-05
IPC分类号： C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/66 , C07K14/005 , C12R1/19
摘要： 本申请公开了一种同时表达蓝舌病病毒vp3和vp7蛋白的大肠杆菌以及蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法。本申请将蓝舌病病毒vp3基因和vp7基因插入到双表达载体pETDuet-1，构建原核双表达质粒pETDuet-VP3-VP7，并转化表达型大肠杆菌BL21(DE3)中，获得含原核双表达质粒pETDuet-VP3-VP7的表达菌，自诱导表达后，通过超声破碎和蔗糖梯度离心获得蓝舌病病毒核心样颗粒。本申请实现了以原核表达方式高量高纯度表达具有良好免疫活性的蓝舌病病毒核心样颗粒。
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公开(公告)号：CN108504778B
公开(公告)日：2019-06-11
申请号：CN201810357649.7
申请日：2018-04-20
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA引物和探针、包括所述引物和探针的试剂盒及其用途。本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的方法所述方法使用所述实时荧光RPA引物和探针和试剂盒。本发明的方法的敏感性为102拷贝/反应，即每个反应可同时最低检测出102拷贝的猪圆环病毒2型和102拷贝的猪伪狂犬病毒。本发明的方法能快捷、高效、灵敏的同时检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒，为两者的混合感染的快速检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN107488745A
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201710775069.5
申请日：2017-08-31
申请人： 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心 , 深圳市检验检疫科学研究院 , 清华大学深圳研究生院
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101
摘要： 本申请公开了一种用于新城疫病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的新城疫病毒检测试剂，包括引物对和探针，引物对上下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或者其反向互补序列；SEQ ID No.3所示的探针序列中，第30碱基修饰6-荧光基团-dT，第31碱基替换为dSpacer，第32碱基修饰荧光淬灭基团-dT，3’端修饰C3 Spacer。本申请的试剂，能通过重组酶聚合酶扩增对新城疫病毒进行灵敏、特异、高效检测。与现有检测方法相比，本申请的试剂和检测方法，时间短，易操作，可快速得出结论，适于现场检测，对新城疫病毒的快速防控具有重大意义。
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公开(公告)号：CN107267665A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710369846.6
申请日：2017-05-23
申请人： 华南农业大学 , 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2563/107
摘要： 本申请公开了一种用于H5亚型禽流感病毒检测的试剂、检测方法和应用。本申请用于H5亚型禽流感病毒检测的试剂，包括引物对和探针，引物对上/下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列，探针为Seq ID No.3所示序列或其反向互补序列；探针中，第27个碱基修饰BHQ1-dT，第30个碱基修饰6-FAM-dT，第28个碱基替换为dSpacer，3’端修饰C3Spacer。本申请的H5亚型检测试剂，能准确灵敏的从众多禽流感病毒中特异性检测出H5亚型，为H5亚型防控提供了一种有效的方法和途径。本申请的检测方法，耗时短、灵敏度高、硬件设备要求低，不需复杂的样本处理，特别适合现场快速检测。
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公开(公告)号：CN104311660A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410554643.0
申请日：2014-10-17
IPC分类号： C07K16/08 , G01N33/569
摘要： 本发明公开一种非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种腹水效价高，亲和力高，抗原用量少、操作简便的新型多克隆抗体的制备方法。所述的非洲猪瘟病毒多克隆抗体的制备包括：对ASFV VP73基因序列PCR扩增、抗原的制备、动物免疫、腹水多克隆抗体提取的步骤。本发明提供的非洲猪瘟病毒VP73蛋白多克隆抗体与常规兔源、鼠源抗血清的制备方式相比，该制备方式具有抗原用量少、操作简便,非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体可以用于非洲猪瘟病毒VP73抗体的检测，为我国非洲猪瘟病的防控提供重要的技术手段。
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公开(公告)号：CN104262484A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410553923.X
申请日：2014-10-17
IPC分类号： C07K16/08 , C07K16/02 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种抗非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性IgY抗体及其制备方法，及利用该方法生产的IgY抗体在特异性检测非洲猪瘟病毒抗体中的应用。该特异性IgY抗体可以通过以下方法制备：利用基因重组表达的方法制备p54蛋白抗原，免疫23周龄海兰蛋鸡，共进行4次免疫，收集鸡蛋，利用饱和硫酸铵沉淀法提取和纯化卵黄免疫球蛋白(IgY抗体)。基于该特异性IgY抗体所建立的检测非洲猪瘟血清抗体的竞争ELISA方法，效果良好，只有非洲猪瘟的阳性血清检测结果呈阳性，与商品化ASFV抗体检测ELISA试剂盒的平行检测结果一致。该竞争ELISA方法可用于非洲猪瘟的血清流行病学普查和监测，防控该病经出入境口岸传入国内。
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公开(公告)号：CN102419369B
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201110236942.6
申请日：2011-08-18
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其是病毒抗体检测领域。本发明所述的小反刍兽疫病毒b-ELISA抗体检测试剂盒包括分别放置的小反刍兽疫核蛋白抗原、小反刍兽疫单克隆抗体、稀释液、强阳性血清、弱阳性血清、阴性血清、HRP羊抗鼠二抗、20倍浓缩洗涤液、底物液、终止液和酶链免疫吸附板。本发明通过实验优化，确定了试剂盒中各组分的最佳配比条件。其试剂盒可用于动物小反刍兽疫病毒抗体的快速诊断、检测，尤其适合于小反刍兽疫流行病学调查时大量样本的抗体检测。本发明的小反刍兽疫b-ELISA检测方法，检测原理、实验操作程序等均不同于BIRAD实验室的c-ELISA检测方法，试剂盒包含的小反刍兽疫核蛋白抗原、小反刍兽疫单克隆抗体均为自行研制。组装试剂盒的检测敏感性、特异性等指标均与国际认可的BIRAD实验室的c-ELISA检测方法相同。
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公开(公告)号：CN103364541A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201310268628.5
申请日：2013-06-28
IPC分类号： G01N33/53
摘要： 本申请公开了一种样品稀释液及其在间接ELISA试验中的应用。本申请的稀释液中含有蛋白终浓度60-100μg/mL的杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，其中，杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物中不含有检测靶标蛋白。本申请的样品稀释液，在其中添加杆状病毒感染的昆虫细胞裂解物，使得采用本申请的样品稀释液进行稀释后的阴性样品的OD值下降，并可缩小不同阴性样品间的标准方差，从而降低了间接ELISA方法中判定结果的临界值，减少了假阳性和假阴性的出现，提高了检测结果的准确性。
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公开(公告)号：CN102337336A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110290476.X
申请日：2011-09-28
摘要： 本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种用于检测家养鹧鸪(石鸡)源性成分的检测方法，尤其涉及一对用于检测家养鹧鸪(石鸡)细胞线粒体核苷酸序列的引物。本发明旨在鉴定饲料、食品等产品中是否含有家养鹧鸪(石鸡)源性成分。通过设计特异性扩增引物，利用PCR技术检测遗传上相对独立，没有重复序列，生物个体内无组织特异性的线粒体DNA，建立了家养鹧鸪(石鸡)源性成分PCR检测方法，以达到快速准确检测鉴定家养鹧鸪(石鸡)源性成分的目的。
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公开(公告)号：CN108034761A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201711339422.1
申请日：2017-12-14
摘要： 本申请公开了一种用于FMDV和SVA鉴别的试剂、方法及应用。本申请的试剂包括FMDV引物探针组和SVA引物探针组；FMDV引物探针组的上下游引物分别为Seq ID No.1和2所示序列，探针为Seq ID No.3或其反向互补序列；SVA引物探针的上下游引物分别为Seq ID No.4和5所示序列，探针为Seq IDNo.6或其反向互补序列。本申请的试剂，能同时对FMDV和SVA进行检测和鉴别，特异性强、灵敏度高，为口蹄疫病毒和猪A型塞内卡病毒的鉴别检测提供了一种高效技术手段。本申请的试剂，适用于两种疫病的快速鉴别检测。
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