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公开(公告)号:CN117586356A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202410066538.6
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请涉及生物技术、基因工程领域,尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽,多肽,其长度为20aa‑50aa,氨基酸序列如下所示:M(X)n‑RX‑(X)m(A)p‑(X)q‑AXA(XXA,AXX),其中,n,m,p,q为0‑10的任意整数,X每次出现,各自独立地为任意氨基酸;M(X)n‑RX为N端带电荷区域;(X)m(A)p‑(X)q为含丙氨酸的疏水区域;AXA(XXA,AXX)为N端带电荷区域。将该多肽融合表达在目标蛋白的N端可实现目标蛋白在宿主中的分泌表达,还能增强目标蛋白的表达水平,即该多肽同时具有介导目标蛋白分泌以及增强目标蛋白表达水平的双重功能。
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公开(公告)号:CN114107148B
公开(公告)日:2023-12-29
申请号:CN202111338339.9
申请日:2021-11-12
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/06 , C12N9/10 , C12N9/00 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/77 , C12P19/26 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种高产透明质酸的基因工程菌株及其应用,所述基因工程菌株是强化透明质酸合成过程中的果糖‑6‑磷酸到D‑葡萄糖胺‑6‑磷酸的反应。本发明的高产透明质酸的基因工程菌株是在出发菌株中同时转入谷氨酰胺‑果糖‑6‑磷酸转氨酶以及谷氨酸合成酶或谷氨酰胺合成酶,来强化透明质酸合成中的限速步骤,从而提高透明质酸的产量。本发明中的宿主谷氨酸棒杆菌是食品安全级菌株,不产生任何内毒素和外毒素。所构建的新菌株摇瓶最高产量是出发菌株的2.8倍,达到17.4g/L,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN117586356B
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410066538.6
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请涉及生物技术、基因工程领域,尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽,多肽,其长度为20aa‑50aa,氨基酸序列如下所示:M(X)n‑RX‑(X)m(A)p‑(X)q‑AXA(XXA,AXX),其中,n,m,p,q为0‑10的任意整数,X每次出现,各自独立地为任意氨基酸;M(X)n‑RX为N端带电荷区域;(X)m(A)p‑(X)q为含丙氨酸的疏水区域;AXA(XXA,AXX)为N端带电荷区域。将该多肽融合表达在目标蛋白的N端可实现目标蛋白在宿主中的分泌表达,还能增强目标蛋白的表达水平,即该多肽同时具有介导目标蛋白分泌以及增强目标蛋白表达水平的双重功能。
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公开(公告)号:CN117586936A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202410066675.X
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请属生物技术、生物催化、基因工程领域,尤其涉及一种基因工程红色红球菌及其构建方法和应用。构建方法包括如下步骤:构建目标基因片段及其表达增强基因片段的融合表达载体;将融合表达载体转化至红色红球菌,构建重组红色红球菌;目标基因片段为漆酶基因的编码区中信号肽编码区域之外的区域,表达增强基因片段编码序列如SEQ ID NO.19或者SEQ ID NO.30所示的多肽;目标基因片段在所述表达增强基因片段的下游。本申请实施例构建的重组红色红球菌能够用于漆酶的异源可溶性表达,能广泛应用于真菌毒素降解、污水处理、染料降解、抗生素降解、有机合成等领域。
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公开(公告)号:CN115961356A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202211318323.6
申请日:2022-10-26
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
IPC: C40B40/06 , C12N15/113 , C12N15/70 , C12N15/77 , C12N15/65 , C12N1/21 , C12Q1/6897 , C12R1/19 , C12R1/15
Abstract: 本发明涉及一种tac启动子文库及其应用。本发明通过改变tac启动子核心区间隔序列的长度、碱基组成以及5’末端非翻译区的长度,构建了一系列具有梯度转录强度的启动子。在此基础上,通过对上述不同区域的最优序列进行组合,构建了一个超强启动子PtacM26。本发明文库中的启动子具有较宽的转录强度范围,能够实现对不同基因的“开量式”微调。
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公开(公告)号:CN114107148A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111338339.9
申请日:2021-11-12
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/06 , C12N9/10 , C12N9/00 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/77 , C12P19/26 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种高产透明质酸的基因工程菌株及其应用,所述基因工程菌株是强化透明质酸合成过程中的果糖‑6‑磷酸到D‑葡萄糖胺‑6‑磷酸的反应。本发明的高产透明质酸的基因工程菌株是在出发菌株中同时转入谷氨酰胺‑果糖‑6‑磷酸转氨酶以及谷氨酸合成酶或谷氨酰胺合成酶,来强化透明质酸合成中的限速步骤,从而提高透明质酸的产量。本发明中的宿主谷氨酸棒杆菌是食品安全级菌株,不产生任何内毒素和外毒素。所构建的新菌株摇瓶最高产量是出发菌株的2.8倍,达到17.4g/L,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN119776197A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202411940618.6
申请日:2024-12-26
Applicant: 清华大学
Abstract: 本申请公开了一种人工多细胞体系及其应用。该人工多细胞体系包含用于目标产物合成的核心菌株和用于目标产物合成前体供应或消除低劣生物质中所含对微生物生长有害的胁迫因子的辅助菌株;所述核心菌株包含选自由表面活性素合成菌株、伊枯草菌素合成菌株和芬芥素合成菌株构成的群组1中的一种或多种;所述辅助菌株包含选自由目标产物合成前体供应菌株和低劣生物质胁迫因子消除菌株构成的群组2中的一种或多种。本申请的一种人工多细胞体系,包含至少2种不同的菌株,可利用生物质进行目标产物脂肽的合成。
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公开(公告)号:CN118667734A
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410715565.1
申请日:2024-06-04
Applicant: 清华大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N9/04 , C12N15/53 , C12P7/16 , C12P7/20 , C12P7/18 , C12P7/04 , C12P7/26 , C12P17/04 , C12P7/06 , C12P7/22 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种制备醇类化合物的方法。本发明提供了一种全细胞催化剂,按照包括如下步骤的方法制备:在底盘宿主红球菌中导入醛还原酶的编码基因并使其表达,得到重组菌,培养所述重组菌,收集重组菌细胞,得到全细胞催化剂。本发明所构建的红球菌全细胞催化剂实现了多种不同来源醛还原酶的可溶性高表达。本发明的最优体系在48h内可实现对5g/L糠醛、2.5g/L 5‑羟甲基糠醛、4g/L香草醛100%转化效率。本发明的有益效果得益于底盘宿主红球菌和基因高表达的结合,二者缺一不可。
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公开(公告)号:CN117402848A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202311278864.5
申请日:2023-09-28
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开透明质酸合成酶突变体、核酸、载体、重组细胞和工程菌及其应用,所述透明质酸合成酶突变体包括:与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列相比,第27位、第28位、第349位和第352位中至少一个位点的氨基酸具有突变且具有透明质酸合成酶活性的蛋白质;或与所述蛋白质的氨基酸序列具有至少80%同源性且具有透明质酸合成酶活性的蛋白质。利用本发明的透明质酸合成酶突变体,可以调控微生物发酵生产不同分子量的透明质酸,基于编码该透明质酸合成酶突变体的核酸,可构建不同的重组细胞,由此获得能生产不同分子量透明质酸的工程菌,适于工业化生产应用。
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公开(公告)号:CN119799699A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202411941026.6
申请日:2024-12-26
Applicant: 清华大学
Abstract: 本申请涉及时序启动子及其应用,该时序启动子包括第一保守区域和第二保守区域;所述第一保守区域的核苷酸序列包括HDTTTCTR,所述第二保守区域的核苷酸序列包括NNBAVNCHV,其中,每个H各自独立地代表A、C或T碱基,D代表A、G或T碱基,R代表A或G碱基,每个N各自独立地代表A、G、C或T碱基,B代表C、G或T碱基,每个V各自独立地代表A、G或C碱基。该启动子无需外加添加剂,在发酵后期表达强度增强,可以实现发酵生产中细胞生长与生产的解耦,有助于透明质酸产量的提升。
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