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公开(公告)号:CN117603900A
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202410080005.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请属于生物技术和生物化工领域,具体涉及到基因工程菌及其构建方法和应用。本申请提供外源表达目标蛋白以及氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的第一分子伴侣或/和氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的第二分子伴侣。相对于传统技术,本申请实施例的有益效果包括:本申请的发明人基于前期的基因文库挖掘,发现了能够提高多种低可溶表达目标蛋白在原核宿主中可溶表达的古菌分子伴侣热聚体,其能够用于原核宿主外源表达,提高目标蛋白可溶表达和活性,亦能在无细胞合成系统中提高目标酶活性和稳定性的应用。
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公开(公告)号:CN117264865A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202311553921.6
申请日:2023-11-21
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/74 , C12P13/02 , C12P17/12 , C12P7/40 , C12P13/00 , C12R1/01
Abstract: 本申请涉及重组红色红球菌及其在化合物合成中的应用,该重组红色红球菌中的类胡萝卜素合成基因被降低表达或敲除;降低表达或敲除的所述类胡萝卜素合成基因包括编码GGPP合成酶的基因crtE‑1、编码八氢番茄红素脱氢酶的基因crtI、编码胡萝卜素合成相关膜蛋白的基因crtM和编码八氢番茄红素合成酶的基因crtB的至少一个。该重组红色红球菌不影响红球菌的生长和产酶、同时降低色素含量。
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公开(公告)号:CN116790573A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202311054507.0
申请日:2023-08-21
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请提供了一种腈水合酶突变体及其应用。腈水合酶突变体为所述野生型腈水合酶的柔性环结构域上的氨基酸残基发生突变,包含突变1‑3中的任意的一项或其组合:突变1:位于野生型腈水合酶β亚基的二级结构域S1和S2之间的柔性环上的极性氨基酸突变,β亚基的152位氨基酸位点发生突变;突变2:位于野生型腈水合酶β亚基的起始端的二级结构域H6和H7之间的柔性环上的极性氨基酸突变,β亚基的110位氨基酸位点发生突变;突变3:位于野生型腈水合酶β亚基的起始柔性环L1上的疏水性氨基酸突变,β亚基的17位氨基酸位点发生突变。本申请的腈水合酶突变体其单独或发挥协同调控效应,具有一定酶活力,具有良好的热稳定性和耐受性。
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公开(公告)号:CN119798400A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202411532200.1
申请日:2024-10-30
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请公开了一种人工传感器元件组合、编码其的核酸、含核酸的重组表达载体、宿主细胞及其应用。该人工传感器元件组合包括多肽链1和多肽链2,以及特异性底物;且用于蛋白质可溶性、稳定性和酶活性的高通量检测。该人工传感器元件组合在检测蛋白质性质时,至少能够解决由蛋白表达、折叠和聚集过程的动态特性导致的常规蛋白可溶性传感器可溶性检测的不准确和假阳性等问题。
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公开(公告)号:CN118272414A
公开(公告)日:2024-07-02
申请号:CN202410417845.4
申请日:2024-04-08
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请提供一种提高微生物细胞通透性的方法以及具有高通透性的微生物,其中所述方法包括:将编码穴蛋白的基因导入到微生物菌株中,以构建携带所述基因的重组微生物菌株;培养所述重组微生物菌株并使所述重组微生物菌株表达穴蛋白,以得到细胞通透性提高的微生物;其中所述穴蛋白为所述微生物所属菌属或亲缘关系相近的菌属的噬菌体相关的穴蛋白。本申请的方法在不影响细胞生长的情况下,提供微生物的细胞通透性,使制备获得的全细胞催化剂对较大分子底物的表观催化酶活有着显著提高。
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公开(公告)号:CN117603900B
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410080005.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请属于生物技术和生物化工领域,具体涉及到基因工程菌及其构建方法和应用。本申请提供外源表达目标蛋白以及氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的第一分子伴侣或/和氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的第二分子伴侣。相对于传统技术,本申请实施例的有益效果包括:本申请的发明人基于前期的基因文库挖掘,发现了能够提高多种低可溶表达目标蛋白在原核宿主中可溶表达的古菌分子伴侣热聚体,其能够用于原核宿主外源表达,提高目标蛋白可溶表达和活性,亦能在无细胞合成系统中提高目标酶活性和稳定性的应用。
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公开(公告)号:CN117586936B
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410066675.X
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请属生物技术、生物催化、基因工程领域,尤其涉及一种基因工程红色红球菌及其构建方法和应用。构建方法包括如下步骤:构建目标基因片段及其表达增强基因片段的融合表达载体;将融合表达载体转化至红色红球菌,构建重组红色红球菌;目标基因片段为漆酶基因的编码区中信号肽编码区域之外的区域,表达增强基因片段编码序列如SEQ ID NO.19或者SEQ ID NO.30所示的多肽;目标基因片段在所述表达增强基因片段的下游。本申请实施例构建的重组红色红球菌能够用于漆酶的异源可溶性表达,能广泛应用于真菌毒素降解、污水处理、染料降解、抗生素降解、有机合成等领域。
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公开(公告)号:CN119490980A
公开(公告)日:2025-02-21
申请号:CN202311460423.7
申请日:2023-08-21
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请提供了一种腈水合酶突变体及其应用。腈水合酶突变体为所述野生型腈水合酶的柔性环结构域上的氨基酸残基发生突变,包含突变1‑3中的任意的一项或其组合:突变1:位于野生型腈水合酶β亚基的二级结构域S1和S2之间的柔性环上的极性氨基酸突变,β亚基的152位氨基酸位点发生突变;突变2:位于野生型腈水合酶β亚基的起始端的二级结构域H6和H7之间的柔性环上的极性氨基酸突变,β亚基的110位氨基酸位点发生突变;突变3:位于野生型腈水合酶β亚基的起始柔性环L1上的疏水性氨基酸突变,β亚基的17位氨基酸位点发生突变。本申请的腈水合酶突变体其单独或发挥协同调控效应,具有一定酶活力,具有良好的热稳定性和耐受性。
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公开(公告)号:CN117586356A
公开(公告)日:2024-02-23
申请号:CN202410066538.6
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请涉及生物技术、基因工程领域,尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽,多肽,其长度为20aa‑50aa,氨基酸序列如下所示:M(X)n‑RX‑(X)m(A)p‑(X)q‑AXA(XXA,AXX),其中,n,m,p,q为0‑10的任意整数,X每次出现,各自独立地为任意氨基酸;M(X)n‑RX为N端带电荷区域;(X)m(A)p‑(X)q为含丙氨酸的疏水区域;AXA(XXA,AXX)为N端带电荷区域。将该多肽融合表达在目标蛋白的N端可实现目标蛋白在宿主中的分泌表达,还能增强目标蛋白的表达水平,即该多肽同时具有介导目标蛋白分泌以及增强目标蛋白表达水平的双重功能。
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公开(公告)号:CN117586356B
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410066538.6
申请日:2024-01-17
Applicant: 清华大学 , 北京衍微科技有限公司
Abstract: 本申请涉及生物技术、基因工程领域,尤其涉及一种多肽及其用途。该多肽,多肽,其长度为20aa‑50aa,氨基酸序列如下所示:M(X)n‑RX‑(X)m(A)p‑(X)q‑AXA(XXA,AXX),其中,n,m,p,q为0‑10的任意整数,X每次出现,各自独立地为任意氨基酸;M(X)n‑RX为N端带电荷区域;(X)m(A)p‑(X)q为含丙氨酸的疏水区域;AXA(XXA,AXX)为N端带电荷区域。将该多肽融合表达在目标蛋白的N端可实现目标蛋白在宿主中的分泌表达,还能增强目标蛋白的表达水平,即该多肽同时具有介导目标蛋白分泌以及增强目标蛋白表达水平的双重功能。
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