公开(公告)号：CN111926029A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010662311.X

申请日：2020-07-10

申请人： 清华大学

发明人： 卢元 ,  汪琛 ,  徐建鸿 ,  耿宇昊

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/74

摘要： 本发明公开了一种提高无细胞体系蛋白质合成的方法。所述方法包括下述步骤：将包裹有编码待合成的目标蛋白质的基因的响应型水凝胶加入到无细胞体系中进行蛋白质的合成。本发明通过使用响应性水凝胶，使得基因聚集在水凝胶的表面，其相对比基因溶液，在进行无细胞反应时具有更高的蛋白质表达量，并且当吸附的基因浓度为10ng/μL时，蛋白质产量为原来的3.7倍，动力学实验显示水凝胶聚集基因进行无细胞反应时具有更好的动力学行为，能够更高效快速的合成目标蛋白质，并且转录过程分析显示水凝胶能够显著的提高无细胞蛋白合成系统的转录水平。

公开(公告)号：CN114672502B

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202210013959.3

申请日：2022-01-06

申请人： 清华大学

发明人： 卢元 ,  杨俊祝 ,  汪琛

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/87 ,  C12P21/02 ,  A61K9/127 ,  A61K47/46 ,  A61K47/42 ,  A61K47/28 ,  A61K47/24 ,  A61K38/16

摘要： 本发明涉及一种质粒，其包括：编码温度敏感元件的基因；位于所述编码温度敏感元件的基因下游的能够通过所述温度敏感元件调控的操纵单元；位于所述操纵单元下游的表达目标蛋白的外源基因。本发明的质粒能够通过所述温度敏感元件调控的操纵单元调控目标蛋白的表达，当温度升高到给定温度时，所述温度敏感元件失活从而操纵单元启动表达目标蛋白，当温度低于给定温度时，所述温度敏感元件抑制操纵单元启动表达目标蛋白。本发明通过所述质粒进一步提供了一种温控无细胞合成体系的构建方法，实现了在无细胞体系中通过温度调控其中目标蛋白的表达。

公开(公告)号：CN114672502A

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202210013959.3

申请日：2022-01-06

申请人： 清华大学

发明人： 卢元 ,  杨俊祝 ,  汪琛

IPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/87 ,  C12P21/02 ,  A61K9/127 ,  A61K47/46 ,  A61K47/42 ,  A61K47/28 ,  A61K47/24 ,  A61K38/16

摘要： 本发明涉及一种质粒，其包括：编码温度敏感元件的基因；位于所述编码温度敏感元件的基因下游的能够通过所述温度敏感元件调控的操纵单元；位于所述操纵单元下游的表达目标蛋白的外源基因。本发明的质粒能够通过所述温度敏感元件调控的操纵单元调控目标蛋白的表达，当温度升高到给定温度时，所述温度敏感元件失活从而操纵单元启动表达目标蛋白，当温度低于给定温度时，所述温度敏感元件抑制操纵单元启动表达目标蛋白。本发明通过所述质粒进一步提供了一种温控无细胞合成体系的构建方法，实现了在无细胞体系中通过温度调控其中目标蛋白的表达。