公开(公告)号：CN113388531B

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202010171977.5

申请日：2020-03-12

申请人： 湖南师范大学

发明人： 胡益波 ,  皮畅钰 ,  张哲 ,  向柏宇 ,  夏立秋

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12R1/80

摘要： 本发明公开了一种提高淀粉酶活性的青霉菌株及其构建方法，所述青霉菌株命名为Δ13AOAmyRΔCreA菌株，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 2019834，保藏日期：2019年10月17日。本发明通过以草酸青霉114基因组为模板，扩增得到碳代谢抑制因子CreA编码区上游约2 kb的启动子区以及约2 kb终止子区作为交换同源臂，同时扩增到含six位点的pyrG序列，将三段序列用Double‑joint方法进行融合，并转入已敲除amy13A同时过表达amyR菌株，促进了表达元件淀粉酶Amy15A启动子Pamy15A的高效表达的菌株，显著提高了淀粉酶的活性。

公开(公告)号：CN111748561A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN201910241603.3

申请日：2019-03-28

申请人： 湖南师范大学

发明人： 胡益波 ,  皮畅钰 ,  张哲 ,  夏立秋

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12N1/15 ,  C12N9/30 ,  C12R1/80

摘要： 一种提高草酸青霉淀粉酶表达效率的方法，本发明从PGA3QL菌株上扩增得到草酸青霉pga3基因的突变序列pga3QL，扩增两端带有six剪切位点pyrG序列，同时扩增pga3基因终止子后约2kb序列作为3’端交换同源臂，将这三段序列用Double-joint方法进行融合，并转入上述含β-rec酶的营养缺陷菌株，持续性激活G蛋白亚基PGA3，以达到增强Pamy15A的启动效率，从而达到增强淀粉酶Amy15A的表达的目的。

公开(公告)号：CN113388531A

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202010171977.5

申请日：2020-03-12

申请人： 湖南师范大学

发明人： 胡益波 ,  皮畅钰 ,  张哲 ,  向柏宇 ,  夏立秋

IPC分类号： C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12R1/80

摘要： 本发明公开了一种提高淀粉酶活性的青霉菌株及其构建方法，所述青霉菌株命名为Δ13AOAmyRΔCreA菌株，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 2019834，保藏日期：2019年10月17日。本发明通过以草酸青霉114基因组为模板，扩增得到碳代谢抑制因子CreA编码区上游约2 kb的启动子区以及约2 kb终止子区作为交换同源臂，同时扩增到含six位点的pyrG序列，将三段序列用Double‑joint方法进行融合，并转入已敲除amy13A同时过表达amyR菌株，促进了表达元件淀粉酶Amy15A启动子Pamy15A的高效表达的菌株，显著提高了淀粉酶的活性。