公开(公告)号：CN115572329B

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202110688404.4

申请日：2021-06-21

申请人： 王大勇

发明人： 王大勇 ,  孙艳 ,  王葆春 ,  王大欣 ,  符生苗 ,  禹勃 ,  耿磊 ,  宋少江 ,  请求不公布姓名

IPC分类号： C07K14/815 ,  C07K19/00 ,  C12N15/15 ,  C12N15/70

摘要： E60D‑I62D‑S48T、HM2‑E60D‑I62D‑K26H‑L30I‑利用蛋白质工程原理和方法，在蛋白质相互 K47H‑S48T和HM2‑E60D‑I62D‑T43S。本发明专利作用分析以及药理学实验基础上，本专利制备了 说明书详细介绍了以上菲牛蛭基因突变水蛭素具有较高抗凝血活性的菲牛蛭基因突变水蛭素 以及它们的制备方法和药理学作用。HM2‑E60D‑I62D。以HM2‑E60D‑I62D为模板，在分析血液蛋白酶的酶切位点以及人工定向进化随(56)对比文件GenBank.APA20848.1: hirudin variantHM4, partial [Hirudinaria manillensis].《GenBank》.2021,标题、PROTEIN、CDS、ORIGIN部分.杨思毅等.水蛭抗凝血活性物质提取方法研究《.山东化工》.2016,第45卷(第05期),第42-44页.GenBank.P81492.2: RecName: Full=Hirudin-HM2;AltName: Full=Bufrudin;AltName: Full=Hirudin-HV1;Flags:Precursor《.GenBank》.2021,标题、PROTEIN、CDS、ORIGIN部分.GenBank.A53883: hirudin HV1 homologbufrudin - leech (Hirudinariamanillensis)《.GenBank》.2004,标题、PROTEIN、CDS、ORIGIN部分.Emanuela SCACHERI等.Novel hirudinvariants from the leech Hirudinariamanillensis. Amino acid sequence, cDNAcloning and genomic organization.《European Journal of Biochemistry》.1993,第214卷(第01期),第295-304页.林陈水、陈微微.分泌型水蛭素Ⅱ基因工程菌的构建《.浙江工业大学学报》.2014,第42卷(第01期),第50-53页.Giuseppe Nicastro等.NMR solutionstructure of a novel hirudin variant HM2,N-terminal 1-47 and N64-->V + G mutant.《Biopolymers》.1998,第41卷(第07期),第731-749页.黎渊弘.广西菲牛蛭水蛭素基因cDNA的克隆与序列分析《.中国生化药物杂志》.2011,第32卷(第02期),第92-98页.

公开(公告)号：CN115572329A

公开(公告)日：2023-01-06

申请号：CN202110688404.4

申请日：2021-06-21

申请人： 王大勇

发明人： 王大勇 ,  孙艳 ,  王葆春 ,  王大欣 ,  符生苗 ,  禹勃 ,  耿磊 ,  宋少江 ,  其他发明人请求不公开姓名

IPC分类号： C07K14/815 ,  C07K19/00 ,  C12N15/15 ,  C12N15/70

摘要： 利用蛋白质工程原理和方法，在蛋白质相互作用分析以及药理学实验基础上，本专利制备了具有较高抗凝血活性的菲牛蛭基因突变水蛭素HM2‑E60D‑I62D。以HM2‑E60D‑I62D为模板，在分析血液蛋白酶的酶切位点以及人工定向进化随机突变基础上，制备血浆代谢速度较缓慢的HM2‑E60D‑I62D突变蛋白：HM2‑E60D‑I62D‑K26H、HM2‑E60D‑I62D‑L30I、HM2‑E60D‑I62D‑K47H、HM2‑E60D‑I62D‑S48T、HM2‑E60D‑I62D‑K26H‑L30I‑K47H‑S48T和HM2‑E60D‑I62D‑T43S。本发明专利说明书详细介绍了以上菲牛蛭基因突变水蛭素以及它们的制备方法和药理学作用。