片段长度在500bp之内DNA的定量方法

    公开(公告)号:CN102914586A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210412809.6

    申请日:2012-10-31

    申请人: 王荣

    IPC分类号: G01N27/447 G01N21/64

    摘要: 本发明涉及一种片段长度在500bp之内DNA的定量方法,该方法包括以下步骤:⑴毛细管柱内壁修饰;⑵配制含TBE的筛分介质;⑶荧光染料的加入量确定;⑷标准品的线性范围考察;⑸检测限:根据所述步骤⑷的检测结果,计算相应信噪比S/N=3时的浓度;⑹重现性:对3根的不同批次所述步骤⑴所得的毛细管按所述步骤⑷检测方法进行分离效果考察,计算峰面积与荧光强度的相对标准偏差(RSD%);⑺样品分析:从病变组织及正常组织的基因组DNA中选定26~501bp片段中一个基因目的片段进行扩增,然后根据所述步骤⑷进样方法进行检测即可。本发明操作简单省时且灵敏度高,可在定量的同时检测片段长度。

    一种用于消化道肿瘤临床早期诊断的辅助方法

    公开(公告)号:CN103014158A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210519065.8

    申请日:2012-12-06

    申请人: 王荣

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明涉及一种用于消化道肿瘤临床早期诊断的辅助方法,该方法包括以下步骤:⑴毛细管柱内壁修饰;⑵配制含TBE的聚环氧乙烷筛分介质;⑶收集血液样品;⑷血液样品中基因组DNA提取;⑸将基因组DNA作为扩增模板,采用pp5分别设计p53、k-ras、APC和C-myc基因目的片段扩增引物,得到p53基因PCR扩增样品、k-ras基因PCR扩增样品、APC基因PCR扩增样品和C-myc基因PCR扩增样品;⑹将p53基因PCR扩增样品、k-ras基因PCR扩增样品、APC基因PCR扩增样品或C-myc基因PCR扩增样品进行变性或进行内切酶,得到变性DNA样品溶液或酶切DNA样品溶液;⑺变性DNA样品溶液或酶切DNA样品溶液进行CE-SSCP或CE-RFLP检测;⑻计算CE-SSCP或CE-RFLP检测突变率之和,即得累积突变率。本发明操作简单、重现性好,可起到消化道肿瘤诊断预警作用。

    一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用

    公开(公告)号:CN107582782A

    公开(公告)日:2018-01-16

    申请号:CN201710976261.0

    申请日:2017-10-19

    申请人: 王荣

    摘要: 本发明涉及天然药物技术领域,特别是一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用。本发明通过整体动物实验表明,槟榔提取物具有显著的抗缺氧活性,不仅可以延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间,同时能够提高急进高原实地缺氧大鼠的抗高原缺氧能力。其机理可能与增加大鼠每分通气量,清除组织中产生的过多自由基和提高抗氧化能力有关。槟榔提取物成分天然,对动物和人体无毒副作用,适用于抗缺氧应用。

    用于研究高原缺氧情况下药物吸收的细胞模型的建立方法

    公开(公告)号:CN106701683A

    公开(公告)日:2017-05-24

    申请号:CN201611113372.0

    申请日:2016-12-07

    申请人: 王荣

    IPC分类号: C12N5/09

    CPC分类号: C12N5/0693

    摘要: 本发明涉及一种用于研究高原缺氧情况下药物吸收的细胞模型的建立方法,该方法包括以下步骤:⑴将Caco‑2细胞采用高糖DMEM培养液培养;⑵采用步骤⑴所得的Caco‑2细胞于12孔板Transwell小室的滤膜上构建Caco‑2细胞单层模型;⑶采用HBSS洗Caco‑2细胞单层模型;⑷测定步骤⑶所得的Caco‑2细胞单层模型的跨膜电阻值,当跨膜电阻值大于400Ω时,则为合格的细胞Caco‑2细胞单层模型;⑸对合格的细胞Caco‑2细胞单层模型进行缺氧培养;⑹对步骤⑸经缺氧培养的Caco‑2细胞单层模型清洗;⑺测定步骤⑹所得的Caco‑2细胞单层模型的跨膜电阻值、荧光黄表观渗透系数,并完成模型评价。本发明操作简单,经济科学,可实现高通量测定,对高原人群个体化用药,合理用药具有较大的促进作用。

    一种急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法

    公开(公告)号:CN104873290A

    公开(公告)日:2015-09-02

    申请号:CN201510161383.5

    申请日:2015-04-07

    申请人: 王荣

    IPC分类号: A61D3/00

    摘要: 本发明涉及一种急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法,该方法包括以下步骤:⑴在高原低压低氧模拟舱中模拟海拔3500米,通过对实验大鼠进行跑台实验,筛选出缺氧敏感型大鼠;⑵随机选取所述缺氧敏感型大鼠,并采用急进高原方式放入高原实验场;⑶建立急进高原实地大鼠缺氧条件;⑷在缺氧24~120h后鉴定所述缺氧敏感型大鼠的血气生化指标和病理指标。本发明简单易行、模型制作成功率高、能真实反应动物缺氧损伤情况且稳定性好。

    一种平原与高原间的实验小动物航空运输方法

    公开(公告)号:CN102696539A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210160089.9

    申请日:2012-05-22

    申请人: 王荣

    IPC分类号: A01K67/02

    摘要: 本发明涉及一种平原与高原间的实验小动物航空运输方法,该方法包括以下步骤:⑴动物的购买及前期饲养:从平原地区购买实验动物,采用标准饲料和灭菌饮用水在清洁级环境下喂养3~7天;⑵动物的检疫;⑶动物的交运:所述实验动物饲养于透气的底部带有托盘的铁质笼具中,该铁质笼具中有全价饲料和饮用水,然后在航空起运前饲养于航空物流公司;⑷动物的航空运输:航班起飞前移除饮用水,保留全价饲料,将所有实验动物笼具打包于规则木箱中,并置于当日航班有氧舱中运输至目的地;⑸动物的接取:航班到达后立即开箱将实验动物转移至带垫料笼具中,给予全价饲料和饮用水,然后运输至实验室。本发明具有快速、安全、经济、操作简单的特点。