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公开(公告)号：CN103014158A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210519065.8
申请日：2012-12-06
申请人： 王荣
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种用于消化道肿瘤临床早期诊断的辅助方法，该方法包括以下步骤：⑴毛细管柱内壁修饰；⑵配制含TBE的聚环氧乙烷筛分介质；⑶收集血液样品；⑷血液样品中基因组DNA提取；⑸将基因组DNA作为扩增模板，采用pp5分别设计p53、k-ras、APC和C-myc基因目的片段扩增引物，得到p53基因PCR扩增样品、k-ras基因PCR扩增样品、APC基因PCR扩增样品和C-myc基因PCR扩增样品；⑹将p53基因PCR扩增样品、k-ras基因PCR扩增样品、APC基因PCR扩增样品或C-myc基因PCR扩增样品进行变性或进行内切酶，得到变性DNA样品溶液或酶切DNA样品溶液；⑺变性DNA样品溶液或酶切DNA样品溶液进行CE-SSCP或CE-RFLP检测；⑻计算CE-SSCP或CE-RFLP检测突变率之和，即得累积突变率。本发明操作简单、重现性好，可起到消化道肿瘤诊断预警作用。
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公开(公告)号：CN101811034B
公开(公告)日：2011-11-09
申请号：CN201010134615.5
申请日：2010-03-25
申请人： 王荣
IPC分类号： C07C217/30 , B01J20/29 , B01J20/30 , B01J20/32 , C08B15/06 , C07C213/10
摘要： 本发明涉及一种大粒径手性固定相的合成，该合成方法采用粒径为40～60μm的硅胶制备了涂敷体积比18～25％的涂敷型和键合型纤维素类衍生物手性固定相，并在正相条件下，对盐酸普萘洛尔对映体获得了较好的手性分离。本发明由于填料孔径大，填料间的空隙大，减小了对流动相的阻力，因此有效地防止了小粒径手性柱柱压高、易堵塞、寿命较短等缺点，同时也有效地降低了手性柱制备中硅胶基质的原料费用。
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公开(公告)号：CN101544816A
公开(公告)日：2009-09-30
申请号：CN200910022397.3
申请日：2009-04-30
申请人： 王荣
摘要： 本发明涉及一种含金纳米粒子的聚环氧乙烷筛分介质，该介质是由1×TBE缓冲液、金纳米粒子和聚环氧乙烷组成的浓度为0.06～1.20％、pH值为8.2～8.4的混合液；其中1×TBE缓冲液与金纳米粒子的体积比为10∶1～10∶3。同时本发明还公开了该介质的合成方法及其在不同长度DNA片段分离中的应用。由于本发明所合成的含金纳米粒子的聚环氧乙烷筛分介质具有特定的选择性分离能力，因此可以完成对不同长度DNA片段的良好分离，并提高检测的灵敏度。
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公开(公告)号：CN102146044B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110008182.3
申请日：2011-01-13
申请人： 王荣
IPC分类号： C07C217/30 , C07C213/10
摘要： 本发明涉及一种盐酸普萘洛尔单一对映体的制备方法，该方法包括以下步骤：(1)将盐酸普萘洛尔消旋体原料药制成饱和溶液；(2)将饱和溶液注入到高效液相色谱系统中，以正己烷-乙醇-异丙醇-二乙胺为流动相、手性色谱柱为固定相进行分离，得到在色谱图不同峰值范围内的普萘洛尔对映体A馏分和B馏分；(3)将普萘洛尔对映体A馏分和B馏分分别经浓缩后挥干，得到盐酸普萘洛尔单一对映体粗品A和B；(4)将正丁醇分别加入到盐酸普萘洛尔单一对映体粗品A和B中，加热溶解，形成热饱和溶液A和B；(5)将热饱和溶液A和B分别经过滤、冷却、干燥，即可得到盐酸普萘洛尔单一对映体A和B。本发明工艺简单，可同时高收率地得到两种高旋光纯度的对映体。
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公开(公告)号：CN102914586A
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201210412809.6
申请日：2012-10-31
申请人： 王荣
IPC分类号： G01N27/447 , G01N21/64
摘要： 本发明涉及一种片段长度在500bp之内DNA的定量方法，该方法包括以下步骤：⑴毛细管柱内壁修饰；⑵配制含TBE的筛分介质；⑶荧光染料的加入量确定；⑷标准品的线性范围考察；⑸检测限:根据所述步骤⑷的检测结果，计算相应信噪比S/N=3时的浓度；⑹重现性：对3根的不同批次所述步骤⑴所得的毛细管按所述步骤⑷检测方法进行分离效果考察，计算峰面积与荧光强度的相对标准偏差（RSD%）；⑺样品分析：从病变组织及正常组织的基因组DNA中选定26~501bp片段中一个基因目的片段进行扩增，然后根据所述步骤⑷进样方法进行检测即可。本发明操作简单省时且灵敏度高，可在定量的同时检测片段长度。
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公开(公告)号：CN102251046A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110218578.0
申请日：2011-07-29
申请人： 王荣
IPC分类号： C12Q1/68 , G01N27/447
摘要： 本发明涉及一种用于检测血液中肿瘤突变基因的方法，该方法包括以下步骤：(1)配制含TBE的聚环氧乙烷筛分介质；(2)提取血液样品中基因组DNA；(3)需检测基因目的片段扩增：将基因组DNA作为扩增模板，进行常规PCR扩增，即得p53基因PCR扩增样品和k-ras基因PCR扩增样品；(4)样品处理：将p53基因PCR扩增样品和k-ras基因PCR扩增样品经变性或酶切后分别得到变性样品溶液、酶切样品溶液；(5)样品检测：分别在变性样品溶液和酶切样品溶液中加入10×SYBR Green I荧光染料与基因组DNA，混匀后加入去离子水至体系为30～50μl；然后，使用毛细管电泳仪压力系统自动填充聚环氧乙烷筛分介质，分别进行CE-SSCP或CE-RFLP检测即可。本发明操作简单、重现性好。
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公开(公告)号：CN107582782A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201710976261.0
申请日：2017-10-19
申请人： 王荣
IPC分类号： A61K36/889 , A61P39/00 , A61P39/06 , A61K131/00
摘要： 本发明涉及天然药物技术领域，特别是一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用。本发明通过整体动物实验表明，槟榔提取物具有显著的抗缺氧活性，不仅可以延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间，同时能够提高急进高原实地缺氧大鼠的抗高原缺氧能力。其机理可能与增加大鼠每分通气量，清除组织中产生的过多自由基和提高抗氧化能力有关。槟榔提取物成分天然，对动物和人体无毒副作用，适用于抗缺氧应用。
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公开(公告)号：CN102600812A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210035131.4
申请日：2012-02-16
申请人： 王荣
摘要： 本发明涉及一种内表面反相限进填料的合成，该合成方法首先采用粒径为5µm的多孔硅胶合成氨丙基烷化硅胶，然后用氨丙基烷化硅胶制备了外表面具有蛋白排阻能力而内表面具有反相性能的限进填料。本发明采用的合成路线免去了此类限进填料常规合成方法中需要选择性地除去外表面的改性基团这一关键步骤，同时由于在反应过程中可简单将内表面上键合的己胺变为其它化合物，使得此合成方法可制备内表面具有不同功能基团的限进。本发明还在水性和反相流动相下，评价了所合成的限进填料的蛋白排阻能力和反相性能，并用于普萘洛尔血清样品的直接进样分析。
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公开(公告)号：CN101544816B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200910022397.3
申请日：2009-04-30
申请人： 王荣
摘要： 本发明涉及一种含金纳米粒子的聚环氧乙烷筛分介质，该介质是由1×TBE缓冲液、金纳米粒子和聚环氧乙烷组成的浓度为0.06～1.20％、pH值为8.2～8.4的混合液；其中1×TBE缓冲液与金纳米粒子的体积比为10∶1～10∶3。同时本发明还公开了该介质的合成方法及其在不同长度DNA片段分离中的应用。由于本发明所合成的含金纳米粒子的聚环氧乙烷筛分介质具有特定的选择性分离能力，因此可以完成对不同长度DNA片段的良好分离，并提高检测的灵敏度。
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公开(公告)号：CN101811034A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN201010134615.5
申请日：2010-03-25
申请人： 王荣
IPC分类号： B01J20/29 , B01J20/30 , B01J20/32 , C08B15/06 , C07C217/30 , C07C213/10
摘要： 本发明涉及一种大粒径手性固定相的合成，该合成方法采用粒径为40～60μm的硅胶制备了涂敷体积比18～25％的涂敷型和键合型纤维素类衍生物手性固定相，并在正相条件下，对盐酸普萘洛尔对映体获得了较好的手性分离。本发明由于填料孔径大，填料间的空隙大，减小了对流动相的阻力，因此有效地防止了小粒径手性柱柱压高、易堵塞、寿命较短等缺点，同时也有效地降低了手性柱制备中硅胶基质的原料费用。
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