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公开(公告)号：CN117737024B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202311764074.8
申请日：2023-12-20
申请人： 皖西学院
摘要： 本发明涉及一种糖基转移酶突变体及酶法制备急性缺血性脑卒中候选药物SHPL‑49的方法。该方法以4‑(4‑甲氧苯基)‑1‑丁醇为原料，经酶催化体系催化获得SHPL‑49。所述酶催化体系包括糖基转移酶突变体和蔗糖合酶。所述糖基转移酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第321位脯氨酸突变为丝氨酸，其比酶活是野生型的3.37倍。采用本发明所述方法，可实现一步法合成SHPL‑49，滴度能够达到6.5g/L，转化率达到95.0％，时空产率325.0mg/L/h。该方法合成工艺步骤短、产物构型单一、转化率高、生产操作简单、设备要求低、绿色环保，在SHPL‑49新药的开发上有较大的前景。
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公开(公告)号：CN118599800A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410782995.5
申请日：2024-06-18
申请人： 皖西学院
IPC分类号： C12N9/10 , C12N9/06 , C12N9/88 , C12N9/04 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P19/44 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及一种提高热稳定性的糖基转移酶突变体及其在红景天苷合成中的应用，属于酶工程技术领域。本发明首先采用计算机辅助设计的方式获得一系列热稳定性显著提高的单点突变株，随后通过对单点突变进行有序组合，获得了热稳定性进一步提高的2点至6点组合突变株，热稳定性研究结果显示最优突变体在40℃的半衰期相比于原始酶提高了133.5倍。将本发明获得的热稳定性突变体用于红景天苷的多酶合成，产量均获得了显著提高，滴度最高达到13.8g/L，是未突变前的4.2倍。本发明成功地解决了红景天苷酶法合成过程中糖基转移酶稳定性差的关键问题，表现出非常大的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN117737024A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311764074.8
申请日：2023-12-20
申请人： 皖西学院
摘要： 本发明涉及一种糖基转移酶突变体及酶法制备急性缺血性脑卒中候选药物SHPL‑49的方法。该方法以4‑(4‑甲氧苯基)‑1‑丁醇为原料，经酶催化体系催化获得SHPL‑49。所述酶催化体系包括糖基转移酶突变体和蔗糖合酶。所述糖基转移酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第321位脯氨酸突变为丝氨酸，其比酶活是野生型的3.37倍。采用本发明所述方法，可实现一步法合成SHPL‑49，滴度能够达到6.5g/L，转化率达到95.0％，时空产率325.0mg/L/h。该方法合成工艺步骤短、产物构型单一、转化率高、生产操作简单、设备要求低、绿色环保，在SHPL‑49新药的开发上有较大的前景。
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公开(公告)号：CN117551718A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311544664.X
申请日：2023-11-16
申请人： 皖西学院
摘要： 本发明公开了一种多酶级联转化L‑酪氨酸生产红景天苷的体系及方法，多酶级联体系由L‑氨基酸脱氨酶、丙酮酸脱羧酶、醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶、糖基转移酶和蔗糖合酶组成。该方法以L‑酪氨酸为原料，首先利用L‑氨基酸脱氨酶将L‑酪氨酸转化为4‑羟基苯丙酮酸，然后利用丙酮酸脱羧酶将4‑羟基苯丙酮酸转化为酪醇，最后利用糖基转移酶将酪醇转化为红景天苷。在此过程中，葡萄糖脱氢酶用于NADPH再生，蔗糖合酶则用于UDP‑葡萄糖再生，能促进反应的正向进行，大大降低生产成本。实现了一菌多酶的共表达，降低了催化剂成本。本发明的方法使红景天苷产量达到2.85g/L，转化率95.0％，时空产率达到142.5mg/L/h。
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