转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体的筛选方法

    公开(公告)号:CN102220311A

    公开(公告)日:2011-10-19

    申请号:CN201110109343.8

    申请日:2011-04-27

    IPC分类号: C12N15/10 C40B50/06

    摘要: 一种转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体的筛选方法,包括将Cry1Ab/Ac蛋白固定在环氧乙烷丙烯酸珠子上;经过14轮的SELEX筛选过程;用显色系统测定奇数轮和最后一轮SELEX筛选产物与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率;将结合率最高的一轮ssDNA文库经过一系列处理后所获得的各适体进行克隆、测序;用显色系统测定经测序后的各ssDNA适体与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率,挑选出结合率最高的适体C03,并通过反筛检测其特异性。本发明的优点在于:所建立的方法程序简单、判定标准明确,方法简易可行,技术要求不高,且适体容易体外制备、循环制备,很易于获取。