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公开(公告)号:CN102220311B
公开(公告)日:2014-10-01
申请号:CN201110109343.8
申请日:2011-04-27
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要: 一种转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体,所述适体为适体C03;所述适体C03的碱基序列为:ccgcggttcc tcggccccct atccacgccg agtcccgaat actccccaga tgtagtagcc ctcagcatag。本发明的优点在于:适体C03与转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白具有较高特异结合活性。
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公开(公告)号:CN102242208B
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201110185901.9
申请日:2011-07-05
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要: 本发明提供了一种双孢蘑菇333号菌株SCAR-PCR鉴定方法,其特征在于:利用SCAR分子标记对双孢蘑菇333号菌株进行PCR扩增。本发明的方法用于特异性地鉴别出双孢蘑菇333号菌株,该方法耗时短,操作简便,特异性强,只针对蘑菇333特异性扩增出389bp的产物,可以更大地保护双孢蘑菇的菌种资源。
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公开(公告)号:CN101418335A
公开(公告)日:2009-04-29
申请号:CN200710009711.5
申请日:2007-10-24
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要: 本发明公开了一种致病性嗜水气单胞菌检测用试剂,包括如下溶液:10xPCR缓冲液1毫升,Pf溶液60微升,Pr溶液60微升,2xPCR水1毫升,Taq酶30微升;以及应用该种致病性嗜水气单胞菌检测用试剂的检测方法。本发明采用的试剂具有灵敏度高、特异性强、模板材料易获得;检测方法操作简便、快速省时的特点。
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公开(公告)号:CN107130032B
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN201710369591.3
申请日:2017-05-23
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
IPC分类号: C12N15/11
摘要: 本发明提供基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法,采用4对引物,用于扩增6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、CO Ⅰ编码基因的4个DNA部分片段(COⅠ基因2条片段),从这4条片段中截取碱基数分别为262bp(16S rDNA)、280bp(Cyt b)、300bp(COⅠ‑1)、345bp(COⅠ‑2)的片段,这4条具有6个鳗鱼物种特异性较强的DNA片段作为标准DNA条形码,通过碱基序列同源性比对分析,建立了6个鳗鱼物种的DNA条形码鉴别方法。该方法耗时短,操作简便,特异性强。
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公开(公告)号:CN104894254A
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201510286313.2
申请日:2015-05-30
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC分类号: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12Q2521/301 , C12Q2565/125
摘要: 本发明涉及一种河豚鱼物种鉴别方法,以优化后确立的DNA提取CTAB方法与PCR引物、扩增体系和温度程序,进行DNA提取、PCR扩增、PCR产物凝胶水平电泳与凝胶成像;在10μL的PCR产物中,加入2.0μL?10×?Cut?smart?Buffer、1.0μL限制性内切酶NmeA?Ⅲ、0.05μL?S-腺苷甲硫胺酸(S-adenosylmethionine,SMA)溶液,再加纯净水6.95μL使总体积达到20μL,在37℃条件下消化16~18h,然后进行琼脂糖凝胶电泳与成像拍照。
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公开(公告)号:CN103045602B
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201310007344.0
申请日:2013-01-09
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
IPC分类号: C12N15/115 , C12Q1/68 , G01N21/64
摘要: 为了提供一种分子生物学快速筛选检测河豚毒素的方法,本发明提供了一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子,并建立一种简便、快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-染料直接法。所述适配子是应用SELEX技术,从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA(ssDNA),能特异结合河豚毒素。所述DNA适配子的核苷酸序列为如SEQ ID NO.1所示;本发明将制备的DNA适配子应用于河豚毒素的分子生物学检测,检测限低。本发明的DNA适配子可通过PCR扩增或人工合成的方式制备,易于获得、长期保存。建立的河豚毒素DNA适配子-染料直接检测法,无需昂贵的仪器和复杂的操作,具有操作简便、成本低廉、快速、灵敏等优点。
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公开(公告)号:CN103740855A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201410045586.3
申请日:2014-02-08
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC分类号: C12Q1/686 , C12Q2563/185
摘要: 本发明涉及一种基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法,更具体涉及一种基于DNA条形码的日本鳗、美洲鳗和欧洲鳗的物种鉴别方法。该方法通过鳗鱼DNA提取,然后利用DNA条形码引物进行PCR扩增,扩增出244bp的产物,所述DNA条形码引物为EEL244-F:CCTGTTCCTCGTGGGGGCTTTT,EEL244-R:ATGGCATAACGAGGGTTTAACTG,最后按照物种核苷酸序列特征变异位点进行物种鉴别。该方法耗时短,操作简便,特异性强,可以鉴别经过加工的、无法从形态学上加以识别的蒲烧鳗鱼等鳗鱼常见加工产品,为维护企业与消费者利益以及正常的市场秩序提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN102220311A
公开(公告)日:2011-10-19
申请号:CN201110109343.8
申请日:2011-04-27
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要: 一种转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体的筛选方法,包括将Cry1Ab/Ac蛋白固定在环氧乙烷丙烯酸珠子上;经过14轮的SELEX筛选过程;用显色系统测定奇数轮和最后一轮SELEX筛选产物与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率;将结合率最高的一轮ssDNA文库经过一系列处理后所获得的各适体进行克隆、测序;用显色系统测定经测序后的各ssDNA适体与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率,挑选出结合率最高的适体C03,并通过反筛检测其特异性。本发明的优点在于:所建立的方法程序简单、判定标准明确,方法简易可行,技术要求不高,且适体容易体外制备、循环制备,很易于获取。
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公开(公告)号:CN107130032A
公开(公告)日:2017-09-05
申请号:CN201710369591.3
申请日:2017-05-23
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
CPC分类号: C12Q1/6888
摘要: 本发明提供基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法,采用4对引物,用于扩增6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、CO Ⅰ编码基因的4个DNA部分片段(COⅠ基因2条片段),从这4条片段中截取碱基数分别为262bp(16S rDNA)、280bp(Cyt b)、300bp(COⅠ‑1)、345bp(COⅠ‑2)的片段,这4条具有6个鳗鱼物种特异性较强的DNA片段作为标准DNA条形码,通过碱基序列同源性比对分析,建立了6个鳗鱼物种的DNA条形码鉴别方法。该方法耗时短,操作简便,特异性强。
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公开(公告)号:CN103045602A
公开(公告)日:2013-04-17
申请号:CN201310007344.0
申请日:2013-01-09
申请人: 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心
IPC分类号: C12N15/115 , C12Q1/68 , G01N21/64
摘要: 为了提供一种分子生物学快速筛选检测河豚毒素的方法,本发明提供了一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子,并建立一种简便、快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-染料直接法。所述适配子是应用SELEX技术,从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA(ssDNA),能特异结合河豚毒素。所述DNA适配子的核苷酸序列为如SEQIDNO.1所示;本发明将制备的DNA适配子应用于河豚毒素的分子生物学检测,检测限低。本发明的DNA适配子可通过PCR扩增或人工合成的方式制备,易于获得、长期保存。建立的河豚毒素DNA适配子-染料直接检测法,无需昂贵的仪器和复杂的操作,具有操作简便、成本低廉、快速、灵敏等优点。
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