一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子及其应用

    公开(公告)号:CN103045602B

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201310007344.0

    申请日:2013-01-09

    IPC分类号: C12N15/115 C12Q1/68 G01N21/64

    摘要: 为了提供一种分子生物学快速筛选检测河豚毒素的方法,本发明提供了一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子,并建立一种简便、快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-染料直接法。所述适配子是应用SELEX技术,从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA(ssDNA),能特异结合河豚毒素。所述DNA适配子的核苷酸序列为如SEQ ID NO.1所示;本发明将制备的DNA适配子应用于河豚毒素的分子生物学检测,检测限低。本发明的DNA适配子可通过PCR扩增或人工合成的方式制备,易于获得、长期保存。建立的河豚毒素DNA适配子-染料直接检测法,无需昂贵的仪器和复杂的操作,具有操作简便、成本低廉、快速、灵敏等优点。

    基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法

    公开(公告)号:CN103740855A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410045586.3

    申请日:2014-02-08

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    CPC分类号: C12Q1/686 C12Q2563/185

    摘要: 本发明涉及一种基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法,更具体涉及一种基于DNA条形码的日本鳗、美洲鳗和欧洲鳗的物种鉴别方法。该方法通过鳗鱼DNA提取,然后利用DNA条形码引物进行PCR扩增,扩增出244bp的产物,所述DNA条形码引物为EEL244-F:CCTGTTCCTCGTGGGGGCTTTT,EEL244-R:ATGGCATAACGAGGGTTTAACTG,最后按照物种核苷酸序列特征变异位点进行物种鉴别。该方法耗时短,操作简便,特异性强,可以鉴别经过加工的、无法从形态学上加以识别的蒲烧鳗鱼等鳗鱼常见加工产品,为维护企业与消费者利益以及正常的市场秩序提供技术支撑。

    转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体的筛选方法

    公开(公告)号:CN102220311A

    公开(公告)日:2011-10-19

    申请号:CN201110109343.8

    申请日:2011-04-27

    IPC分类号: C12N15/10 C40B50/06

    摘要: 一种转BT基因水稻Cry1Ab/Ac蛋白适体的筛选方法,包括将Cry1Ab/Ac蛋白固定在环氧乙烷丙烯酸珠子上;经过14轮的SELEX筛选过程;用显色系统测定奇数轮和最后一轮SELEX筛选产物与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率;将结合率最高的一轮ssDNA文库经过一系列处理后所获得的各适体进行克隆、测序;用显色系统测定经测序后的各ssDNA适体与Cry1Ab/Ac蛋白的结合率,挑选出结合率最高的适体C03,并通过反筛检测其特异性。本发明的优点在于:所建立的方法程序简单、判定标准明确,方法简易可行,技术要求不高,且适体容易体外制备、循环制备,很易于获取。

    一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子及其应用

    公开(公告)号:CN103045602A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201310007344.0

    申请日:2013-01-09

    IPC分类号: C12N15/115 C12Q1/68 G01N21/64

    摘要: 为了提供一种分子生物学快速筛选检测河豚毒素的方法,本发明提供了一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子,并建立一种简便、快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-染料直接法。所述适配子是应用SELEX技术,从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA(ssDNA),能特异结合河豚毒素。所述DNA适配子的核苷酸序列为如SEQIDNO.1所示;本发明将制备的DNA适配子应用于河豚毒素的分子生物学检测,检测限低。本发明的DNA适配子可通过PCR扩增或人工合成的方式制备,易于获得、长期保存。建立的河豚毒素DNA适配子-染料直接检测法,无需昂贵的仪器和复杂的操作,具有操作简便、成本低廉、快速、灵敏等优点。