公开(公告)号：CN109517043B

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN201811409551.8

申请日：2018-11-23

申请人： 艾美诚信生物制药有限公司

发明人： 黄玲玲 ,  卢晶晶 ,  于佳平 ,  张柳 ,  董晓丽 ,  姜海洋 ,  徐坤 ,  王力

IPC分类号： C07K14/14 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  C07K1/14

摘要： 本发明涉及一种原核表达重组轮状病毒抗原P2‑VP8的纯化方法，属于蛋白质纯化技术领域。本发明所述纯化方法包括菌体预处理的步骤、柱层析的步骤；其中，所述柱层析的步骤为：①先将预处理后的菌体采用强阴离子填料柱层析，获得洗脱峰；②再将步骤①所得洗脱峰采用羟基磷灰石填料柱层析，获得穿透峰。本发明所述纯化方法中羟基磷灰石填料柱层析对纯度的提升也很明显，传统的疏水层析后电泳可见明显杂带，纯度在90％，羟基磷灰石填料去除杂蛋白的能力较强，电泳条带单一，无其他杂带，纯度可到99％。

公开(公告)号：CN109053867B

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN201810975080.0

申请日：2018-08-24

申请人： 艾美诚信生物制药有限公司

发明人： 于佳平 ,  张柳 ,  董晓丽 ,  卢晶晶 ,  黄玲玲 ,  徐德启 ,  苏彩霞

IPC分类号： C07K14/14 ,  C12P21/02

摘要： 本发明公开了高密度发酵表达重组轮状病毒ΔVP8*抗原的培养方法，所述方法包括种子活化、接种种子罐、移种发酵罐培养、流加补料培养、诱导表达以及离心收菌、破碎澄清的步骤，该方案可有效提升重组大肠杆菌在高密度培养条件下可溶性重组蛋白的表达量，较普通的培养方案在提升菌体密度的同时，明显提升可溶性蛋白的表达量，且具有无需调控pH，操作方便，可控性强，稳定性好、生产成本低以及可规模放大的特点。