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公开(公告)号:CN118813657A
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202411006529.4
申请日:2024-07-25
申请人: 荆楚理工学院
IPC分类号: C12N15/70 , C07K16/10 , C07K16/06 , C12N15/13 , G01N33/531 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N23/225 , C12R1/19
摘要: 本发明公开了RSMV编码糖蛋白抗体的制备与应用,本研究以RSMV G蛋白为靶点建立检测体系,构建重组表达载体pET28a‑RSMV‑G,制备特异性抗血清。酶联免疫吸附法(ELISA)是一种简便、快速的检测方法,也适用于水稻植株和叶蝉载体中RSMV的高通量检测。本研究制备了抗RSMV的多克隆抗体,用于斑点酶联免疫吸附试验(dot‑ELISA)、免疫印迹法和免疫电镜试验。采用dot‑ELISA方法对广东地区水稻和叶蝉样品进行RSMV检测。同时建立并优化了RSMV的dot‑ELISA检测方法,提高了快速检测RSMV的效率。该检测方法具有检测特异性好,灵敏度高,可视化,无需专业实验室仪器设备等优点;对感病水稻和单头传毒昆虫进行检测,检测效果均优于RT‑PCR,且适用于田间快速检测。