ISG15-(H4)2-IFN-λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用

    公开(公告)号:CN119139459B

    公开(公告)日:2025-03-07

    申请号:CN202411603641.6

    申请日:2024-11-12

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用。本发明选择(H4)2连接肽将ISG15与IFN‑λ3连接制备得到ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,可以实现IFN‑λ3蛋白的稳定、大量表达,解决了无法使用原核表达系统大量生产IFN‑λ3的技术问题,同时,本发明对ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在体内的抗PRRSV活性进行了验证,证明重组表达的ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白对抑制PRRSV在体内的复制有抑制效果,减轻肺脏中的炎性因子的分泌并改善了PRRSV感染后引起的病毒血症。

    ISG15-(H4)2-IFN-λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用

    公开(公告)号:CN119139459A

    公开(公告)日:2024-12-17

    申请号:CN202411603641.6

    申请日:2024-11-12

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在制备预防、治疗PRRSV感染的药物中的应用。本发明选择(H4)2连接肽将ISG15与IFN‑λ3连接制备得到ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白,可以实现IFN‑λ3蛋白的稳定、大量表达,解决了无法使用原核表达系统大量生产IFN‑λ3的技术问题,同时,本发明对ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白在体内的抗PRRSV活性进行了验证,证明重组表达的ISG15‑(H4)2‑IFN‑λ3重组蛋白对抑制PRRSV在体内的复制有抑制效果,减轻肺脏中的炎性因子的分泌并改善了PRRSV感染后引起的病毒血症。

    一种猪LAG3蛋白特异性阻断剂的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN119930813A

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202510181466.4

    申请日:2025-02-19

    Abstract: 本发明适用于生物医药技术,提供了一种猪LAG3蛋白特异性阻断剂的制备方法及其应用,其中,该制备方法包括以下步骤:将编码猪免疫检查点胞外区序列通过酶切连接的方法构建至质粒载体中,得到重组质粒;将重组质粒转化至感受态细胞,通过MSX加压筛选,得到稳定表达重组蛋白,纯化后得到重组蛋白;利用重组蛋白免疫动物后,经细胞融合、克隆筛选,获得阻断猪免疫检查点的阳性杂交瘤细胞株;将阳性杂交瘤细胞株注射经液体石蜡预处理的动物后,收集腹水并纯化,得到猪LAG3蛋白特异性阻断剂;该阻断剂对猪LAG3具有较强的特异性、较高的亲和力,阻断LAG3与其配体结合后传递的抑制信号,促进宿主细胞激活及其对病毒的提呈及杀伤能力。

    一种猪血清样中病原抗体ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112285347A

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN202011062115.5

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,以寻找可被病原感染的猪血清样本识别的CD4+T表位抗原肽序列,进一步将所有抗体ELISA检测为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性抗体检测。

    一种猪血清样中病原抗体ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN112285347B

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202011062115.5

    申请日:2020-09-30

    Abstract: 为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获 重组表达,作为人工抗原用于给定病原的特异性猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗 抗体检测。原的猪白细胞抗原II类DR分子(SLA‑DR),将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后,脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列,鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列,并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化,作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测,

    一种猪LAG3单克隆抗体的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN115651082A

    公开(公告)日:2023-01-31

    申请号:CN202211375544.7

    申请日:2022-11-04

    Inventor: 穆杨 郑旭 丛日华

    Abstract: 本发明适用于与猪LAG3结合的抗体技术领域,提供了一种猪LAG3单克隆抗体的制备方法,包括以下步骤:步骤1、猪LAG3基因克隆;步骤2、重组表达载体构建;步骤3、重组菌制备与保存;步骤4、电泳样品制备;步骤5、重组蛋白制备;步骤6、小鼠免疫;步骤7、SP2/0细胞准备;步骤8、细胞融合;步骤9、阳性细胞筛选;步骤10、单克隆抗体鉴定。本发明公开的单克隆抗体对猪LAG3具有较强的特异性、较高的亲和力,其中单克隆抗体sLAG3 1C2能用于猪LAG3的免疫荧光染色和Western blot等检测。

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