公开(公告)号：CN108624619A

公开(公告)日：2018-10-09

申请号：CN201810169114.7

申请日：2018-02-28

Applicant: 西南大学

Inventor： 周林燕 ,  方雪莲 ,  罗凤 ,  杨兰英 ,  王德寿

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明属于水产养殖及现代农业技术领域，一种罗非鱼pgr/mstn基因纯合敲除雌性完全不育品系及构建方法，证明了罗非鱼pgr基因纯合敲除导致雌性完全不育、雄性可育的特征，以及利用此特点构建pgr-/-/mstn-/-双基因敲除不育品系，构建养殖新品系的可行性。本发明成功建立并鉴定罗非鱼pgr基因纯合敲除雌性完全不育品系，pgr基因纯合敲除雄鱼可育品系，pgr基因纯合敲除雄性可以用于生产双基因敲除群体，筛选得到不育雌性后代，不育是稳定可靠的。同时，mstn-/-基因敲除个体的生长速度明显优于正常个体，敲除的雌性个体不能产生后代，不会对野生遗传资源造成基因组污染。

公开(公告)号：CN116904523A

公开(公告)日：2023-10-20

申请号：CN202310718342.6

申请日：2023-06-16

Applicant: 西南大学

Inventor： 杨兰英 ,  周林燕

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/873 ,  C12N15/53 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了利用基因编辑技术构建产卵行为缺失的雌性罗非鱼的方法，本发明是基于CRISPR/Cas9基因编辑技术在尼罗罗非鱼中突变类固醇合成酶编码基因cyp17a2，导致雌性个体丢失挖沙筑巢的产卵行为，进而在罗非鱼中建成雌性不育群体；即在尼罗罗非鱼中通过CRISPR/Cas9基因编辑技术成功建立了cyp17a2纯合敲除系，通过突变cyp17a2基因可控制基因突变雌鱼的育性，进而防止突变位点的渐渗以及保护自然环境的多样性；此种方法不仅可以丰富cyp17a2基因的功能研究，同时为水产动物的育性控制技术的开发提供新思路。

公开(公告)号：CN116144708A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202211200006.4

申请日：2022-09-29

Applicant: 西南大学

Inventor： 周林燕 ,  杨兰英 ,  吴忧 ,  张雪锋

IPC: C12N15/873 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027 ,  C12N15/53

Abstract: 本发明提供了一种全雄不育尼罗罗非鱼品系及其构建方法，所述全雄不育尼罗罗非鱼品系是CRISPR/Cas9基因编辑获得的尼罗罗非鱼类固醇合成酶编码基因cyp17a1纯合敲除系。本发明首次成功建立的cyp17a1纯合敲除突变系完全摆脱了对雄激素处理的依赖，是环境友好、生态绿色的养殖候选品种。同时不育和快速生长，可以避免突变鱼在野外养殖过程中造成野生遗传资源的污染，并且节约成本提高养殖效益。本发明提供的cyp17a1纯合敲除系还将为鱼类乃至脊椎动物研究性别分化、不育提供一个基因功能缺失平台，这个平台将有助于进一步认识cyp17a1基因作用机制。

公开(公告)号：CN114438132A

公开(公告)日：2022-05-06

申请号：CN202210140942.4

申请日：2022-02-16

Applicant: 西南大学

Inventor： 吴忧 ,  周林燕

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/55 ,  C12N15/12 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供一种尼罗罗非鱼mstnb纯合敲除系的建立方法及以此获得的快速生长品系，所述方法包括：(1)将尼罗罗非鱼mstn基因gRNA与Cas9 mRNA混合，并室温孵育获得gRNA与Cas9 mRNA的复合物；向复合物中加入小分子染料混合均匀即得CRISPR/Cas9基因编辑的显微注射液，(2)使人工授精后一细胞期尼罗罗非鱼受精卵均匀平躺于培养皿中；(3)将所述显微注射液转至微型针管中并利用显微注射仪将其注射至所述步骤(2)固定的细胞受精卵中,(4)注射后将受精卵转入26±2℃恒温循环水孵化系统中进行孵化。本发明方法获得的mstnb突变尼罗罗非鱼在七月龄较野生型体重增长50％左右，为提高尼罗罗非鱼养殖产量提供重要支撑，具有良好的应用前景。