一种提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法及其家蚕品种

    公开(公告)号:CN114540364A

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202210213529.6

    申请日:2022-03-04

    申请人: 西南大学

    摘要: 本发明提供一种提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法及其家蚕品种,提高蚕茧中丝素蛋白含量的转基因方法通过GAL4/UAS系统,分别构建了在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm和特异性敲除BmYki和BmSd,均获得了后部丝腺增大的转基因家蚕;通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmYki能提高家蚕的丝素蛋白含量,或通过在家蚕后部丝腺中特异性敲除BmSd能提高家蚕的丝素蛋白含量,或通过在家蚕后部丝腺中特异性过表达BmDimm能提高家蚕的丝素蛋白含量。本发明根据家蚕基因组序列数据库中家蚕丝腺表达内源基因的序列密码子偏好性,对Cas9蛋白的基因序列进行了优化设计,使Cas9基因更有利于在家蚕个体丝腺中表达;通过GAL4/UAS系统及CRISPR/Cas9基因编辑技术对家蚕丝腺进行了组织特异性的敲除和过表达。

    一种针对家蚕MSG和PSG表达基因的可控编辑方法

    公开(公告)号:CN114540421B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202210213352.X

    申请日:2022-03-04

    申请人: 西南大学

    摘要: 本发明提供了一种针对家蚕MSG和PSG表达基因的可控编辑方法,其通过GAL4/UAS系统,分别构建了若干个在家蚕MSG中特异启动表达的GAL4表达载体和多个在家蚕PSG中特异启动表达的GAL4表达载体,通过将表达Cas9基因序列与U6驱动表达的gRNA靶点一起串联在UAS序列下游,最终构建成UAS表达载体,进而利用GAL4/UAS遗传操作工具达到家蚕基因的可控编辑。本发明根据家蚕基因组序列数据库中家蚕基因的序列密码子偏好性,对Cas9蛋白的基因序列进行了优化设计,使Cas9基因更有利于在家蚕丝腺中高效表达。本发明利用该可控的基因编辑技术可精准研究家蚕丝腺基因的功能和创制更多的生物遗传资源。