一种多聚磷酸激酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN118813578A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202411259522.3

    申请日:2024-09-10

    摘要: 本发明提供一种多聚磷酸激酶突变体,以解决ATP再生系统效率低的问题。多聚磷酸激酶突变体是将野生型多聚磷酸激酶的氨基酸突变为Y286Stop或者L290Stop,多聚磷酸激酶突变体比野生型多聚磷酸激酶酶活性高。多聚磷酸激酶突变体转化到大肠杆菌,获得含有多聚磷酸激酶突变体的基因工程菌。以D‑核糖、ATP和烟酰胺为底物,多聚磷酸激酶突变体、核糖激酶、磷酸核糖焦磷酸激酶、烟酰胺磷酸核糖转移酶催化生成NMN。在3小时内使NMN产量分别达到25.2 g/L和23.6 g/L,产率都超过70%,具有广泛的工业应用前景。

    一种生物酶法合成黄素腺嘌呤二核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN117625509A

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202311740605.X

    申请日:2023-12-18

    摘要: 本发明提供一种生物酶法合成黄素腺嘌呤二核苷酸的方法,将FAD合成酶基因构建在pET‑28a(+)载体上,命名为pET‑28a(+)‑SdFADs,将质粒pET‑28a(+)‑SdFADs转到大肠杆菌感受态细胞BL21(ED3)构建重组菌,并进行诱导表达。以FMN、ATP、Mg2+为底物,加入重组菌产生的含FAD合成酶的粗酶液催化合成黄素腺嘌呤二核苷酸。FAD合成酶是一个双功能酶,具有核黄素激酶的催化活性和FMN腺苷酰转移酶的催化活性,既可将RF催化合成FMN,也可将FMN催化合成FAD。称取FMN 20mM,ATP 30mM,Mg2+35mM,加入6g/L粗酶液,在40℃恒温水浴锅中,pH8.0条件下反应2h,NMN产量为11.82g/L。

    一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法

    公开(公告)号:CN117448250A

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202311599842.9

    申请日:2023-11-28

    摘要: 本发明提供一种高效酶法合成烟酰胺单核苷酸的方法,将PPK2基因和NRK基因构建在同一个pET‑28a(+)载体上,实现2个基因共表达,命名为pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK,将质粒pET‑28a(+)‑PPK2‑NRK转到大肠杆菌感受态细胞BL21(ED3)构建重组菌,并进行诱导表达。以NR‑CL、ATP、MgCL2、(NaPO3)6为底物,加入重组菌产生的含PPK2酶和NRK酶的粗酶液催化合成烟酰胺单核苷酸。其中PPK2催化ADP转化为ATP,或者将AMP催化成ADP,再将ADP转化为ATP,使ATP在反应体系中再生循环,NRK催化NR‑CL和ATP合成NMN。称取NR‑CL 390mM,ATP 35mM,MgCL 280 mM,(NaPO3)6 75mM,加适量水溶解,待物质充分溶解后,加入3g/L粗酶液,在40℃恒温水浴锅中,pH7.0条件下反应3h,NMN产量为127.6g/L。

    一种酸碱调节的多功能水浴锅

    公开(公告)号:CN221868513U

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202323447341.7

    申请日:2023-12-18

    摘要: 本实用新型涉及一种酸碱调节的多功能水浴锅,属于水浴锅技术领域;所述酸碱调节的多功能水浴锅包括电磁搅拌器、立杆、水浴锅、环形加热管、冷凝机构、固定机构、加料机构,所述水浴锅安装在电磁搅拌器上,且水浴锅内安装有环形加热管,所述水浴锅顶部侧面设有导气管,导气管和冷凝机构连接;所述电磁搅拌器上固定安装有立杆,立杆上滑动连接有用于固定实验容器的固定机构,以及用于向实验容器内添加物质的加料机构。本实用新型通过设置冷凝结构,减低因水蒸气凝结对实验过程的影响,通过固定机构对实验容器进行固定,避免实验容器出现漂浮现象,保证实验的顺利进行。