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公开(公告)号：CN105296444B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201510878108.5
申请日：2015-12-04
申请人： 郑州大学
摘要： 本发明公开了一种重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵工艺：首先将活化的重组毕赤酵母菌株进行培养，制得发酵工作种子液，然后将该其转接到基础盐培养基中，氨水或磷酸调整发酵体系pH后接种，并加入适量微量元素溶液，生长至一定阶段后，加入甘油与微量元素的混合溶液，最后流加含微量元素的甲醇溶液进行蛋白诱导发酵，发酵过程中温度持续维持在29℃，DO维持在20%以上，甲醇诱导120h，整个发酵过程结束。本发明的发酵工艺简单，操作方便，蛋白可溶性表达且表达量高，酶活性高，但蛋白表达成本却较低。本发明首次在酵母表达系统内对乙酰胆碱酯酶进行了大规模的发酵罐表达，为AChE的大规模生产和最终应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105296444A
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201510878108.5
申请日：2015-12-04
申请人： 郑州大学
摘要： 本发明公开了一种重组乙酰胆碱酯酶在甲醇毕赤酵母中表达的中试发酵工艺：首先将活化的重组毕赤酵母菌株进行培养，制得发酵工作种子液，然后将该其转接到基础盐培养基中，氨水或磷酸调整发酵体系pH后接种，并加入适量微量元素溶液，生长至一定阶段后，加入甘油与微量元素的混合溶液，最后流加含微量元素的甲醇溶液进行蛋白诱导发酵，发酵过程中温度持续维持在29℃，DO维持在20%以上，甲醇诱导120h，整个发酵过程结束。本发明的发酵工艺简单，操作方便，蛋白可溶性表达且表达量高，酶活性高，但蛋白表达成本却较低。本发明首次在酵母表达系统内对乙酰胆碱酯酶进行了大规模的发酵罐表达，为AChE的大规模生产和最终应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105928929A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610246230.5
申请日：2016-04-20
申请人： 郑州大学
IPC分类号： G01N21/78
CPC分类号： G01N21/78
摘要： 本发明公开了一种农药残留快速检测点卡，包括长条形扁平薄壳状卡体，卡体由卡座和扣合在卡座上的卡盖组成，卡座上间隔排列有多个检测孔，检测孔内自下而上依次叠放有底物膜和酶膜；卡盖由左卡盖和右卡盖组成，在左卡盖上开设有与卡座最左侧的检测孔相对应的对照品加样孔，在右卡盖上开设有与其他检测孔位置分别相对应的多个加样孔；底物膜由滤纸膜、玻璃纤维素膜或聚酯纤维素膜在吲哚乙酸酯中充分浸泡并经冷冻抽干后制成；酶膜由滤纸膜、聚酯纤维素膜或玻璃纤维素膜在乙酰胆碱酯酶液中经充分浸泡并经冷冻抽干后制成。本发明提供的农药残留快速检测点卡使用方便，检测灵敏度更高，可以满足现有国家标准的限量要求，在实际中具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN205607868U
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201620332174.2
申请日：2016-04-20
申请人： 郑州大学 , 郑州贝贝生物科技有限公司
IPC分类号： G01N21/78
摘要： 本实用新型公开了一种农药残留快速检测点卡，包括卡座和卡盖，卡座上间隔排列有多个检测孔，检测孔内自下而上依次叠放有底物膜和酶膜；卡盖上开设有与检测孔位置相对应的多个加样孔。卡盖由左卡盖和右卡盖组成，在左卡盖上开设有与卡座最左侧的检测孔相对应的对照品加样孔。检测孔的直径为5~8mm，相邻两检测孔之间的距离为3~5mm；置于检测孔内的底物膜的厚度为0.1~0.3mm，酶膜的厚度为0.3~0.5mm。本实用新型结构简单，易于制备，成本低；操作方便，无需特殊设备，不用要求检测人员的专业水平，可随时随地对现场果蔬等食品进行农药残留量的检测，特别适用于对农贸市场等大量果蔬样本的筛查，结果准确，灵敏度高。
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