快速筛选新冠病毒RBD特异性全人源中和性单克隆抗体方法

    公开(公告)号:CN111925439A

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN202010839232.1

    申请日:2020-08-19

    Abstract: 本发明属于单克隆技术领域,具体公开了快速筛选新冠病毒RBD特异性全人源中和性单克隆抗体方法,包括以下步骤:S1-S3、采集新冠肺炎康复患者的外周血,分选RBD特异性记忆B细胞,采用RT-PCR扩增获得抗体可变区cDNA;S4、采用巢式PCR扩增S1-S3得到的抗体可变区cDNA,构建抗体可变区基因表达盒;S5、将S4得到的抗体可变区基因表达盒转导入细胞表达抗体并收集上清,筛选RBD特异性单克隆抗体;S6、将S5得到的RBD特异性抗体上清,检测阻断假病毒感染细胞活性,同时使用ELISA检测上清阻断RBD与ACE2结合能力,双重方法检测单克隆抗体中和能力,筛选RBD特异性中和性单克隆抗体。本发明能够快速、高效获得新冠病毒RBD特异性全人源中和性单克隆抗体。

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