公开(公告)号：CN118581158A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410952614.3

申请日：2024-07-16

申请人： 重庆医科大学附属儿童医院

发明人： 刘玲娟 ,  盛子贤 ,  李佳锦 ,  袁文静 ,  田杰 ,  全珺珺 ,  潘博

IPC分类号： C12N15/89 ,  C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  A01K67/0275

摘要： 本发明提供了一种限制型心肌病动物模型的构建方法，属于生物技术领域。本发明采用基因敲除技术敲除动物心肌细胞中的Tnni3基因，动物为非人动物，具体包括：确定Tnni3基因待突变的位点后设计sgRNA、同源修复模板Donor序列；将sgRNA、Cas9 mRNA以及Donor混合后注射到动物受精卵中，然后将注射后存活的受精卵移植到假孕动物子宫中，出生的一代是被编辑的F0代；鉴定获得阳性杂合子，然后将阳性杂合子与野生型进行交配，获得F1代，被鉴定为阳性的F1代杂合子可稳定遗传，在F1代杂合子小鼠之间进行杂交，繁育所得后代即可筛选获得限制型心肌病动物的纯合子和杂合子。