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公开(公告)号：CN117987409A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202311792716.5
申请日：2023-12-25
Applicant: 重庆大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6818 , C12Q1/48
Abstract: 本发明公开一种用于不同细胞周期端粒酶活性检测的荧光探针及其检测方法，属于生化技术领域。所述荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述荧光探针是通过DNA链退火以形成DNA发夹探针，该DNA链包括端粒酶引物序列，端粒酶延伸互补序列和端粒酶引物部分互补序列，在DNA链上标记了荧光基团和猝灭基团，荧光基团因与猝灭基团接近而被猝灭。相比于经典的基于聚合酶链式反应(PCR)的端粒重复扩增法，本发明利用一种成本更低、更稳定，特异性更好的DNA发夹探针标记和杂交替换，减少了分子错配问题，大大简化了端粒酶活性检测步骤，提高了检测结果的可靠性，同时该探针还可根据荧光强度分选出端粒酶活性最强的S期细胞。
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公开(公告)号：CN113358617B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202110614317.4
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于医疗检测技术领域，公开了一种胞外囊泡富集检测方法，该方法经DNA四面体合成、磁珠结合及提取外泌体后进行外泌体富集检测，该方法利用外泌体表面特异性蛋白，基于DNA折纸的适配体和免疫亲和磁珠的空间识别双重识别捕获的方法，进一步结合DNA荧光探针，从而实现外泌体的快速分离捕获，可用于定量检测外泌体。本发明适用于用作试剂盒实现外泌体富集分离与检测，对使其在疾病诊断、病理研究及新药开发等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN108642162A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810291290.8
申请日：2018-03-30
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种用于原位无损检测胞外囊泡内核酸分子的多面体探针及其制备方法和应用，包括核酸多面体骨架以及位于多面体顶角的识别靶基因的探针结构，所述探针结构上修饰淬灭基团，所述核酸多面体骨架上修饰发光基团；该探针可快速、灵敏、特异检测胞外囊泡内多种核酸分子，可根据临床或研究检测需要对特定的靶标核酸分子进行设计应用。
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公开(公告)号：CN115044701A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210768659.6
申请日：2022-06-30
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 重庆大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/682 , C12N15/11 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于白酒酿造技术领域，具体涉及酿酒酵母的特异性探针、定量检测方法及应用。本发明所解决的技术问题是提供快速、准确的识别酿酒酵母的特异性探针、定量检测方法及应用。本发明的方法，包括如下步骤：将待测样品与杂交链式反应探针缓冲液混合后充分反应，然后加入底物发夹探针反应，再加入氯化血红素、ABTS以及过氧化氢混合反应，根据混合溶液最终颜色定量待测样品中的酿酒酵母。本发明通过设计探针检测体系，实现了酿酒酵母的26s rDNA的识别，信号放大以及最终的比色检测，通过构建巧妙而精简的等温扩增体系，实现了酿酒酵母26s rDNA的超灵敏，高特异性和简单便携的比色检测。
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公开(公告)号：CN115141833A
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202210724044.3
申请日：2022-06-23
Applicant: 重庆大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/115 , C12N5/09 , G01N33/569 , G01N33/574 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种外泌体分离富集方法及其应用，属于生物技术领域。本发明设计了一种胆固醇尾端修饰的DNAzyme探针和一种CD63适体缀合的底物探针，它们可以特异性地锚定在sEV的膜表面。DNAzyme探针和底物探针的链之间的杂交触发了用于sEV富集的三维DNAzyme复合物的形成，在Mg2+存在下可以将其切割以释放富集的sEV。这些分离的sEV可以通过在底物探针中使用荧光素‑猝灭剂对进行标记来准确量化，从而在切割后实现可控的荧光释放。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115044662A
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN202210692847.5
申请日：2022-06-17
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/682 , C12Q1/6818 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于酶检测技术领域，公开了一种端粒酶表达丰度和活性综合检测技术的探针组合及其应用，该探针组合包括可形成发夹结构的启动探针、可与启动探针互补形成双链复合结构的端粒酶引物探针、可形成发夹结构的杂交链式反应探针和包括连接区、DNAzyme活性区和识别区的MNAzyme探针。探针组合用于端粒酶表达丰度和活性综合检测技术，通过探针预处理形成发夹结构探针和双链杂交茎环结构探针，进一步将探针负载于二氧化锰纳米材料，形成DNA‑MnO2复合物，利用荧光共聚焦成像，实现端粒酶的痕量检测，同步实现端粒酶表达丰度定量和端粒酶活性量化。本发明可用于高灵敏度、高特异性对细胞内端粒酶原位检测。
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公开(公告)号：CN112143831A
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN202011054573.4
申请日：2020-09-29
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6825 , G01N21/64 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种仿生类细胞结构传感器及其制备方法和应用，属于生物传感器技术领域。其由脂质体，在其表面的蛋白受体，包封在其中的CRISPR‑Cas系统组成。制备方法为：向脂质体中加入表面活性剂，然后加入蛋白受体，再导入CRISPR‑Cas系统，振荡，去除活性剂，即得。本发明的仿生类细胞结构传感器用于检测壳核病毒，借助病毒与仿生类细胞之间的蛋白结合，使病毒与类细胞结构进行膜融合，从而将其中的核酸序列导入类细胞结构中，触发其中CRISPR‑Cas系统的切割，较传统方法展现出更高的检测灵敏性，避免了核酸提取带来的误差和生物安全隐患，在检测壳核病毒领域，具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号：CN113358617A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110614317.4
申请日：2021-06-02
Applicant: 重庆大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于医疗检测技术领域，公开了一种胞外囊泡富集检测方法，该方法经DNA四面体合成、磁珠结合及提取外泌体后进行外泌体富集检测，该方法利用外泌体表面特异性蛋白，基于DNA折纸的适配体和免疫亲和磁珠的空间识别双重识别捕获的方法，进一步结合DNA荧光探针，从而实现外泌体的快速分离捕获，可用于定量检测外泌体。本发明适用于用作试剂盒实现外泌体富集分离与检测，对使其在疾病诊断、病理研究及新药开发等领域得到广泛应用具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN116411048B
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202310107943.3
申请日：2023-02-14
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a的多核苷酸激酶活性检测方法，属于生物技术领域。该检测方法以CRISPR/Cas12a作为检测体系的信号输出平台，并整合TdT引物延伸技术和Klenow片段扩增技术的信号放大特点，以此策略实现了多聚核苷酸激酶酶活性量化检测。本发明进一步提高了检测灵敏度，实现了高度灵敏、特异、快速、经济高效地对靶标核酸进行多重检测，无需专业操作人员和复杂设备，适用于现场部署和即时检测。
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公开(公告)号：CN115044662B
公开(公告)日：2024-10-18
申请号：CN202210692847.5
申请日：2022-06-17
Applicant: 重庆大学
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/682 , C12Q1/6818 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于酶检测技术领域，公开了一种端粒酶表达丰度和活性综合检测技术的探针组合及其应用，该探针组合包括可形成发夹结构的启动探针、可与启动探针互补形成双链复合结构的端粒酶引物探针、可形成发夹结构的杂交链式反应探针和包括连接区、DNAzyme活性区和识别区的MNAzyme探针。探针组合用于端粒酶表达丰度和活性综合检测技术，通过探针预处理形成发夹结构探针和双链杂交茎环结构探针，进一步将探针负载于二氧化锰纳米材料，形成DNA‑MnO2复合物，利用荧光共聚焦成像，实现端粒酶的痕量检测，同步实现端粒酶表达丰度定量和端粒酶活性量化。本发明可用于高灵敏度、高特异性对细胞内端粒酶原位检测。
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