公开(公告)号：CN101407812B

公开(公告)日：2011-11-16

申请号：CN200810069952.3

申请日：2008-07-09

Applicant: 重庆大学

Inventor： 陈国平 ,  胡宗利 ,  邓晓洁 ,  刘志昭 ,  顾峰

IPC: C12N15/19 ,  C12N15/81 ,  C07K14/52 ,  A61K38/19 ,  A61P19/02 ,  A61P29/00 ,  A61P37/06 ,  A61P9/00 ,  A61P35/00 ,  A61P31/18

Abstract: 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT-PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融合蛋白的甲醇诱导表达以及纯化鉴定等分子生物学技术和蛋白表达与纯化技术，实现人RANTES蛋白的分泌表达。为了便于人RANTES蛋白的分离纯化，在目的蛋白N端融合一个6×His纯化标签，并在His-tag和RANTES蛋白之间加入肠激酶(EK)酶切位点构建RANTES融合蛋白，然后通过亲和层析和EK酶切得到纯度较高、产量较大的人RANTES蛋白，该蛋白可用于制备治疗多发性硬化关节炎、类风湿性关节炎、器官移植排斥、心脑血管疾病、肿瘤以及HIV药物的用途。

公开(公告)号：CN101284877A

公开(公告)日：2008-10-15

申请号：CN200810069786.7

申请日：2008-05-30

Applicant: 重庆大学

Inventor： 胡宗利 ,  张宁 ,  陈国平 ,  李勇 ,  顾峰 ,  候晓姝

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C12N15/81 ,  A61K38/16 ,  A61P7/02

Abstract: 本发明涉及一种重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的抗血栓的融合蛋白，它包括靶向的FXa识别序列和抗凝血酶活性和抗血小板聚集的RGD－HV，本发明还公开了重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的抗血栓的融合蛋白制备方法和用途。本发明融合蛋白可防止各类血栓的形成及延伸，能够靶向性地抑制血栓的形成，具有抗凝血酶活性和血小板聚集活性双功能，副作用小，适用于预防和治疗各种静脉性和动脉性血栓性疾病，效果良好。

公开(公告)号：CN101407812A

公开(公告)日：2009-04-15

申请号：CN200810069952.3

申请日：2008-07-09

Applicant: 重庆大学

Inventor： 陈国平 ,  胡宗利 ,  邓晓洁 ,  刘志昭 ,  顾峰

IPC: C12N15/19 ,  C12N15/81 ,  C07K14/52 ,  A61K38/19 ,  A61P19/02 ,  A61P29/00 ,  A61P37/06 ,  A61P9/00 ,  A61P35/00 ,  A61P31/18

Abstract: 本发明涉及一种具有趋化作用的人类RANTES蛋白的异源表达和纯化方法。采用具有高表达、高稳定、高分泌和低成本的毕赤酵母表达体系，通过RT－PCR克隆人RANTES基因、人RANTES融合蛋白表达载体构建、人RANTES融合蛋白的甲醇诱导表达以及纯化鉴定等分子生物学技术和蛋白表达与纯化技术，实现人RANTES蛋白的分泌表达。为了便于人RANTES蛋白的分离纯化，在目的蛋白N端融合一个6×His纯化标签，并在His－tag和RANTES蛋白之间加入肠激酶(EK)酶切位点构建RANTES融合蛋白，然后通过亲和层析和EK酶切得到纯度较高、产量较大的人RANTES蛋白，该蛋白可用于制备治疗多发性硬化关节炎、类风湿性关节炎、器官移植排斥、心脑血管疾病、肿瘤以及HIV药物的用途。