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公开(公告)号：CN103088158A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310010844.X
申请日：2013-01-11
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，涉及一种应用实时荧光定量PCR技术对猪瘟病毒进行定量检测的方法。本发明通过从含有猪瘟病毒的组织或细胞培养液中提取RNA核酸，应用自行设计的引物和探针特异性检测并定量猪瘟病毒。本发明包括设计的特异性引物序列和荧光探针序列，以及与之配套的定量PCR反应体系和反应程序，及检测样品的结果判定方法。本发明并解决了传统检测猪瘟兔化弱毒疫苗株使用的活兔体定型热方法存在的各种不足，可以快速对猪瘟病毒进行检测和定量，用于猪瘟疫苗质量监控及合理化配苗等领域，并可为猪瘟病毒的早期快速诊断提供有力的工具，具有快速，准确、特异性好、灵敏度高的优点，可以进行定性、定量检测，具有很强的推广性和实用性。
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公开(公告)号：CN103088157A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310010827.6
申请日：2013-01-11
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明提供了鉴别和定量口蹄疫双价苗以及多价苗中抗原的血清型的一种方法，通过样品处理提取疫苗破乳后水相中口蹄疫病毒RNA，应用荧光定量PCR检测方法来扩增样品中不同血清型的口蹄疫病毒RNA，进行鉴别和定量检测，其中，O型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：1~3所示，AsiaI型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：4~6所示，A型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：7~9所示。本发明的方法具有灵敏性高、稳定性高、特异性好、可以分别准确定量样品中不同型的抗原等特点；具有检测范围广的特点，在100～1010拷贝范围内具有良好的线性关系，检测范围可以达到10个数量级。
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公开(公告)号：CN103088157B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201310010827.6
申请日：2013-01-11
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明提供了鉴别和定量口蹄疫双价苗以及多价苗中抗原的血清型的一种方法，通过样品处理提取疫苗破乳后水相中口蹄疫病毒RNA，应用荧光定量PCR检测方法来扩增样品中不同血清型的口蹄疫病毒RNA，进行鉴别和定量检测，其中，O型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：1~3所示，AsiaI型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：4~6所示，A型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：7~9所示。本发明的方法具有灵敏性高、稳定性高、特异性好、可以分别准确定量样品中不同型的抗原等特点；具有检测范围广的特点，在100～1010拷贝范围内具有良好的线性关系，检测范围可以达到10个数量级。
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公开(公告)号：CN102242213A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201110194160.0
申请日：2011-07-14
Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域，涉及一种用于检测支原体的PCR方法。本发明通过提取支原体核酸，应用支原体特异性引物进行PCR扩增及电泳来判断检测样品中是否存在支原体污染，电泳图中如出现435bp特异性条带，表明该样品中存在支原体，如果没有出现435bp特异性条带，表明该样品中不存在支原体。经检测验证，本发明的检测体系具有特异性高、稳定性好和检验周期短等特点。
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