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公开(公告)号：CN110257554A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201810199898.8
申请日：2018-03-12
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了一种用于检测塞尼卡谷病毒(SVV)的实时荧光定量PCR检测试剂盒及其专用引物、TaqMan探针。本发明能对塞尼卡谷病毒实施快速检测，可为疫苗生产过程中的质量监控和合理化配苗提供依据，指导塞尼卡谷病毒疫苗生产。本发明的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、敏感性高、重复性好，可以实现对塞尼卡谷病毒的准确定量，将在塞尼卡谷病毒的检测及疫苗生产中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN108192898B
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201810032082.6
申请日：2018-01-12
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了塞尼卡谷病毒SVV/CH/ZZ/2016的全基因组序列及其扩增引物。本发明先用一步RT‑PCR方法扩增出SVV/CH/ZZ/2016株的7个核苷酸序列片段(S1、S2、S3、S4、S5、S6和S7)，然后对7个核苷酸序列片段进行克隆测序，再将7个核苷酸序列片段的DNA序列依次进行拼接、编辑及校正，最终得到塞尼卡谷病毒SVV/CH/ZZ/2016的全基因组序列。本发明获得的塞尼卡谷病毒SVV/CH/ZZ/2016全基因组序列有利于塞尼卡谷病毒致病机制、分子流行病学、反向遗传学等的进一步研究，从而对塞尼卡谷病毒的诊断试剂开发、疫苗研制等奠定重要的数据支持和理论基础。
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公开(公告)号：CN109134622A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201810933260.2
申请日：2018-08-16
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
CPC分类号： C07K14/005 , C12N2770/32122
摘要： 本发明公开了一种口蹄疫抗原的多步连续集成纯化方法，是从BHK‑21悬浮细胞培养的口蹄疫病毒液中多步连续集成纯化得到口蹄疫抗原，包括经离心澄清、超滤浓缩和/或深层过滤澄清后的离子交换层析等步骤。该多步连续集成纯化方法，使用深层过滤技术结合PEG沉淀法去除口蹄疫超滤浓缩液中的部分杂蛋白成分，再根据口蹄疫抗原表面所带电荷的差异性，应用离子交换层析和疏水层析进行多步层析纯化的工艺。本发明可用于高纯度口蹄疫抗原的制备，对超滤浓缩液的单次处理量可达900ml，纯度可达到90％，适用于要求纯度大于90％的口蹄疫抗原的大规模生产，并可根据生产规模进行扩缩，用于生产高纯度抗原的精制口蹄疫疫苗。
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公开(公告)号：CN106048054A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610634844.0
申请日：2016-08-03
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
CPC分类号： C12Q1/6888 , C12Q2600/16
摘要： 本发明公开了对实验室常用的七种不同种属来源的细胞(MDBK、MDCK、BHK21、ST、SP20、293、VERO)的PCR检测引物和检测方法与应用。本发明的检测引物包括7对引物，且各引物仅对各自种属细胞的细胞色素b(Cytb)基因片段有特异性扩增，因此，用本发明的引物可以一次性对7种种属来源的细胞进行检测，具有较高的特异性，不仅可以对实验室常用细胞的种属来源(即细胞来源的可靠性)进行鉴定，还可以对培养过程中是否存在不同种属间细胞的交叉污染进行判定，对细胞培养以及后续实验的顺利进行提供科学依据。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速、简便的优点。
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公开(公告)号：CN104740627A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510148904.3
申请日：2015-03-31
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/245 , A61P31/22 , C12N7/00 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种兽用伪狂犬弱毒活疫苗的规模化生产方法，是利用细胞悬浮工艺培养伪狂犬病毒弱毒株，使反应器内悬浮培养的BHK21-C13细胞密度大于或等于2×106细胞/mL，然后用含伪狂犬病悬浮种毒的病毒维持液进行培养，再将收获的伪狂犬弱毒病毒液经澄清、配苗、分装、冻干后得到兽用伪狂犬弱毒活疫苗。本发明能够实现伪狂犬弱毒病毒大量增殖，大大提高病毒滴度与抗原产量，实现工艺自动化，提高了疫苗的质量，不仅能提高BHK21-C13细胞密度，自动监控细胞生长或病毒繁殖的最适生化条件，提高病毒滴度，而且工艺规模放大相对容易，疫苗质量稳定、批间差小，生产和应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN103088157B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201310010827.6
申请日：2013-01-11
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明提供了鉴别和定量口蹄疫双价苗以及多价苗中抗原的血清型的一种方法，通过样品处理提取疫苗破乳后水相中口蹄疫病毒RNA，应用荧光定量PCR检测方法来扩增样品中不同血清型的口蹄疫病毒RNA，进行鉴别和定量检测，其中，O型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：1~3所示，AsiaI型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：4~6所示，A型口蹄疫病毒引物和探针的序列分别如SEQ ID NO：7~9所示。本发明的方法具有灵敏性高、稳定性高、特异性好、可以分别准确定量样品中不同型的抗原等特点；具有检测范围广的特点，在100～1010拷贝范围内具有良好的线性关系，检测范围可以达到10个数量级。
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公开(公告)号：CN110542755A
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201810526601.4
申请日：2018-05-28
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： G01N33/533 , G01N33/536 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及一种利用免疫标记法检测塞尼卡谷病毒(SVV)的试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒是利用荧光染料或过氧化物酶标记IgG抗体，利用免疫荧光法或免疫过氧化物酶法检测塞尼卡谷病毒的原理制得。本发明试剂盒能够快速、准确检测SVV病毒，应用于实验室快速诊断，而且可对病原进行准确定位，指示各组织器官的感染程度，对研究SVV的致病机理具有重要意义，且制备试剂盒的方法可根据实际生产灵活选择，制成的试剂盒敏感性、稳定性、特异性均能满足检测需要，适合批量生产，以应对突发的疫情。
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公开(公告)号：CN110358864A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910672178.3
申请日：2019-07-24
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针，属于生物技术检测领域。并基于提供的引物和探针开发出了用于同时检测SVA、FMDV、SVDV和VSV的试剂盒。本发明提供的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、敏感性高、重复性好，可以实现对SVA、FMDV、SVDV和VSV同时准确定性和定量检测，将在SVA、FMDV、SVDV和VSV的检测及疫苗生产、例如疫苗生产过程中的质量监控和合理化配苗中发挥重要作用，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN105734007B
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201610136832.5
申请日：2016-03-10
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： C12N5/071 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了一种筛选对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系的方法。先对MDBK细胞进行单克隆，然后接种两种生物型(致细胞病变型和非致细胞病变型)的牛病毒性腹泻/黏膜病毒，最后用间接免疫荧光技术测定病毒滴度，确定病毒滴度高于106TCID50/mL的为对牛病毒性腹泻/黏膜病毒敏感的MDBK细胞系。本发明筛选的MDBK细胞系对两种生物型的牛病毒性腹泻/黏膜病毒均敏感，可直接应用于牛病毒性腹泻/黏膜病疫苗的研究和生产。
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公开(公告)号：CN104984334B
公开(公告)日：2018-06-26
申请号：CN201510362361.5
申请日：2015-06-26
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/205 , A61P31/14 , A61P33/10 , A61P33/12 , A61P33/14 , A61K31/4985
摘要： 本发明公开了一种狂犬病弱毒苗‑吡喹酮复合剂及其制备方法与应用，原料包括吡喹酮、复合溶媒、附加剂和狂犬病弱毒苗。该狂犬病弱毒苗‑吡喹酮复合剂，在保证各有效成分药效的基础上，解决了水溶性狂犬病弱毒苗与脂溶性抗寄生虫药吡喹酮稳定混合的难题。制备方法简单可行。
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